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機體總抗氧化力的氨基酸和基因基礎以及氧化對抗體活性及其它實驗室指標的影響

發(fā)布時間:2017-04-13 17:08

  本文關鍵詞:機體總抗氧化力的氨基酸和基因基礎以及氧化對抗體活性及其它實驗室指標的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的: 本文通過研究氨基酸和蛋白的抗氧化能力,了解機體的抗氧化力的影響因素;并探討氧化是否對蛋白抗體活性產(chǎn)生影響;同時對隨機選取的糖尿病、心血管等疾病病人的抗氧化能力、常用生化指標以及膽固醇酯轉運蛋白(cholesteryl estertransfer protein,CETP)基因3個多態(tài)位點(TaqIB、I405V、D422G)進行了檢測,來探討氧化-抗氧化系統(tǒng)與基因多態(tài)性、以及常用實驗室指標之間的關聯(lián)。 方法: 1.對于抗氧化能力的測定,選取了氧化還原滴定法(微量高錳酸鉀法、微量碘量法)和T-AOC試劑盒法3種方法對組成人體蛋白質的常用22種氨基酸進行了分析。 2.把已得到的氨基酸抗氧化能力強弱的數(shù)據(jù),與在“全球蛋白質知識庫“和“蛋白質的一級結構數(shù)據(jù)庫”中查詢的蛋白質的氨基酸構成的數(shù)據(jù)信息結合,了解蛋白的抗氧化能力。 3.在醫(yī)院隨機采集140名與糖尿病、心血管相關的病人的血液標本,平均年齡為59.93±11.31歲,男女比例為61:79,利用特異性PCR技術(AS-PCR)對血液標本進行CETP基因多態(tài)位點(TaqIB、I405V、D422G)進行檢測;同時檢測常用生化指標值(葡萄糖、總蛋白、球蛋白、白蛋白、白球比、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、尿素、肌酐、尿酸、總膽固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇),并應用微量高錳酸鉀法、微量碘量法和總抗氧化能力檢測(T-AOC)試劑盒法3種方法對他們的血清抗氧化能力測定,探討機體氧化、抗氧化能力與CETP基因多態(tài)性以及生化指標之間的聯(lián)系。 4.分別擬用3種不同的氧化劑(高錳酸鉀溶液、碘溶液、過氧化氫溶液)以適當?shù)谋壤c血清抗體(卵清蛋白和乙型肝炎表面抗體)混合,作用一段時間后,,再對卵清抗體和乙型肝炎表面抗體進行酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)比較檢測結果。 結果: 1.對3種方法測得的數(shù)據(jù)應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件求取二次曲線,再利用積分公式求曲線下面積得到抗氧化能力值,然后對所得的數(shù)值進行編秩排序得到22種氨基酸抗氧化能力由強到弱的順序為:具有較強抗氧化能力的氨基酸為色氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、組氨酸、賴氨酸、半胱氨酸;抗氧化能力較弱或幾乎沒有活性者為丙氨酸、4-羥脯氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、蘇氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、胱氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸。 2.人血清不同種類蛋白(人血清蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、球蛋白、組蛋白)的抗氧化能力除了精蛋白外彼此相關性P<0.05,提示蛋白的抗氧化能力差別不大。 3.機體表現(xiàn)出氧化或抗氧化活性與CETP多態(tài)基因的等位基因D有相關性,與某些血清生化指標也相關。 4.高錳酸鉀和碘對卵清抗體免疫反應的影響都是以某一濃度為界限,高于某個濃度,它們起到抑制作用,低于某個濃度,它們便起到輕微的促進作用;過氧化氫對卵清抗體的免疫反應是在高于某一濃度都起到輕微的促進作用,而沒有抑制的現(xiàn)象;高錳酸鉀對乙肝表面抗體的免疫反應,在高于某濃度時起抑制作用,升高趨勢不明顯;碘對乙肝表面抗體的免疫反應的影響也以某濃度為界限,濃度高起抑制作用,濃度低起輕微促進作用;過氧化氫對乙肝表面抗體免疫反應的影響為,在一定濃度范圍內均起到抑制作用。 結論: 1.血清蛋白的抗氧化能力可能與蛋白的種類關系不大。 2.機體的抗氧化能力與CETP基因多態(tài)位點的等位基因D有關,而與等位基因D所表達的產(chǎn)物可能關系不大。 3.氧化應激對機體免疫反應有一定的影響作用,在一定條件下可能抑制機體的免疫反應,對機體的免疫反應起到危害作用。
【關鍵詞】:氨基酸 蛋白質 抗氧化能力 基因多態(tài)性 氧化 血清生化指標
【學位授予單位】:大連醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R392
【目錄】:
  • 摘要8-11
  • Abstract11-15
  • 前言15-19
  • 參考文獻18-19
  • 第一章 22 種不同氨基酸抗氧化能力的定量比較19-33
  • 摘要19-20
  • 英文前言20-21
  • Material and Method21-26
  • Results26-28
  • Discussion28-31
  • References31-33
  • 第二章 血清總抗氧化能力與蛋白的關系33-45
  • 方法33-40
  • 1. 以人血清蛋白為例說明查詢方法33-40
  • 1.1 輸入網(wǎng)址33-36
  • 1.2 獲取蛋白質的氨基酸組成36-40
  • 2. 數(shù)據(jù)分析40
  • 結果40-42
  • 討論42-44
  • 參考文獻44-45
  • 第三章 氧化、抗氧化與 CETP 基因多態(tài)位點及各項生化指標的關系45-55
  • 材料與方法45-50
  • 1. 材料45-46
  • 1.1 主要儀器45-46
  • 1.2 主要試劑46
  • 2. 方法46-50
  • 2.1 氧化還原滴定法46
  • 2.2 生化指標的檢測46
  • 2.3 等位基因多態(tài)性檢測46-49
  • 2.4 結果處理49-50
  • 2.4.1 血清總抗氧化能力結果處理49
  • 2.4.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計49-50
  • 結果50-53
  • 討論53-54
  • 參考文獻54-55
  • 第四章 氧化對抗體活性的影響55-65
  • 材料與方法55-58
  • 1. 材料55-56
  • 1.1 主要試劑55-56
  • 1.2 主要儀器56
  • 2. 方法56-58
  • 結果58-61
  • 討論61-64
  • 參考文獻64-65
  • 全文總結65-66
  • 工作展望66-67
  • 綜述67-78
  • 參考文獻73-78
  • 附錄78-79
  • 致謝79-80

【參考文獻】

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  本文關鍵詞:機體總抗氧化力的氨基酸和基因基礎以及氧化對抗體活性及其它實驗室指標的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:304060

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