阻斷巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1a對炎癥小鼠子宮巨噬細(xì)胞及干擾素-γ的影響
本文關(guān)鍵詞:阻斷巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1a對炎癥小鼠子宮巨噬細(xì)胞及干擾素-γ的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:以LPS誘導(dǎo)的炎癥小鼠為模型,通過阻斷MIP-1α,,研究MIP-1α在母體子宮炎癥反應(yīng)時(shí),對子宮巨噬細(xì)胞及其表面受體CD14以及細(xì)胞因子IFN-γ產(chǎn)生的影響,從而探討MIP-1α在小鼠子宮局部免疫反應(yīng)中的作用。 方法:將75只昆明種雌性小鼠隨機(jī)分為三組,每組25只,分別為對照組(A組)、模型組(B組)以及實(shí)驗(yàn)組(C組)。A組第一天上午9:00尾靜脈注射PBS0.2ml,第二天同一時(shí)間注射PBS50μl;在同樣時(shí)間,B組首次尾靜脈注射LPS0.2ml,第二次注射PBS50μl;C組首次注射LPS0.2ml,第二次注射MIP-1α多克隆抗體50μl。三組小鼠分別于末次注射后的五個(gè)時(shí)間點(diǎn)1h、3h、6h、12h、24h處死,剖開腹腔取出其子宮,A組的五個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別標(biāo)記為A1、A3、A6、A12、A24;另外B和C兩組做與其類似的標(biāo)記。各組小鼠子宮分別做石蠟切片和免疫組化方法檢測CD14巨噬細(xì)胞的數(shù)量和分布變化情況,以及EILSA方法檢測阻斷后的MIP-1α和IFN-γ的表達(dá)量。 結(jié)果:(1) A組中CD14+巨噬細(xì)胞主要分布于子宮內(nèi)膜和外膜,肌層很少;B組中CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量明顯增多且各部分組織中分布均勻;C組子宮外膜CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量則明顯多于子宮內(nèi)膜和肌層。(2)B組與A組相比,小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量、CD14以及IFN-γ的表達(dá)量均極顯著升高(P0.01)。(3) C組與A組相比,IFN-γ的表達(dá)量1h、3h、6h時(shí)與A組無明顯差異,12h和24h時(shí)極顯著升高(P㩳0.01)。小鼠子宮內(nèi)膜與肌層中CD14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量、CD14的表達(dá)量1h、3h、6h與A組基本一致,12h、24h極顯著升高(P㩳0.01),子宮外膜巨噬細(xì)胞數(shù)量及CD14表達(dá)量極顯著高于A組(P0.01)。(4)C組與B組相比,IFN-γ的表達(dá)量極顯著降低(P0.01)。小鼠子宮內(nèi)膜與肌層中CD14+巨噬細(xì)胞的數(shù)量、CD14的表達(dá)量極顯著降低(P0.01);1h、3h、6h時(shí)子宮外膜CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量和CD14表達(dá)量均極顯著降低(P0.01),12h和24h則與B組無顯著差異。 結(jié)論:(1)在LPS誘導(dǎo)的小鼠子宮炎癥反應(yīng)中,MIP-1α的高表達(dá)可以引起巨噬細(xì)胞數(shù)量增多,CD14和IFN-γ的表達(dá)量顯著升高。(2)通過阻斷MIP-1α,可以減輕小鼠子宮內(nèi)部的炎癥反應(yīng),減少巨噬細(xì)胞的數(shù)量,降低CD14及IFN-γ的表達(dá)量。(3) MIP-1α對于趨化小鼠子宮巨噬細(xì)胞起著重要作用,阻斷MIP-1α可以抑制巨噬細(xì)胞從子宮系膜區(qū)和外膜向內(nèi)膜的遷移,從而在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】:小鼠 子宮 巨噬細(xì)胞 LPS MIP-1α IFN-γ CD14
【學(xué)位授予單位】:河南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R363
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-13
- 1 前言13-29
- 1.1 妊娠與母胎免疫耐受13-16
- 1.1.1 妊娠13
- 1.1.2 免疫耐受13-15
- 1.1.3 母胎免疫耐受15-16
- 1.2 脂多糖(LPS)與流產(chǎn)16-18
- 1.2.1 脂多糖(LPS)16-17
- 1.2.2 流產(chǎn)17-18
- 1.3 參與母胎界面調(diào)節(jié)的免疫細(xì)胞18-25
- 1.3.1 巨噬細(xì)胞18-22
- 1.3.2 其他重要免疫細(xì)胞22-25
- 1.4 調(diào)節(jié)母胎界面的細(xì)胞因子25-29
- 1.4.1 趨化因子和巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)25-26
- 1.4.2 干擾素-γ(IFN-γ)26-29
- 2 材料與方法29-37
- 2.1 材料29-30
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物29
- 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑和配制29-30
- 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器30
- 2.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容30-37
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組30
- 2.2.2 實(shí)驗(yàn)取材30
- 2.2.3 實(shí)驗(yàn)材料的制備30-31
- 2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法31-35
- 2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)35-37
- 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析37-61
- 3.1 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮 CD1~(4+)巨噬細(xì)胞的影響37-45
- 3.1.1 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮內(nèi)膜 CD1~(4+)巨噬細(xì)胞分布的影響37-39
- 3.1.2 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮肌層 CD1~(4+)巨噬細(xì)胞分布的影響39-42
- 3.1.3 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮外膜 CD1~(4+)巨噬細(xì)胞分布的影響42-45
- 3.2 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮 CD14 表達(dá)的影響45-53
- 3.2.1 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮內(nèi)膜 CD14 表達(dá)的影響45-48
- 3.2.2 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮肌層 CD14 表達(dá)的影響48-51
- 3.2.3 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮外膜 CD14 表達(dá)的影響51-53
- 3.3 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮 MIP-1α表達(dá)的影響53-56
- 3.4 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮 IFN-γ表達(dá)的影響56-61
- 4 討論61-67
- 4.1 本論文研究的意義及出發(fā)點(diǎn)61-62
- 4.2 LPS 誘導(dǎo)炎癥過程中巨噬細(xì)胞、CD14、MIP-1α、IFN-γ的關(guān)系62
- 4.3 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮 CD1~(4+)巨噬細(xì)胞以及 CD14 表達(dá)的影響62-63
- 4.4 阻斷 MIP-1α對小鼠子宮內(nèi) MIP-1α和 IFN-γ表達(dá)的影響63-64
- 4.5 阻斷 MIP-1α后小鼠子宮炎性細(xì)胞與炎性因子數(shù)量和表達(dá)的變化64-67
- 5 結(jié)論67-69
- 參考文獻(xiàn)69-77
- 圖版77-83
- 致謝83-84
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄84-85
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:阻斷巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1a對炎癥小鼠子宮巨噬細(xì)胞及干擾素-γ的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:302717
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