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結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達對新疆地區(qū)耐藥結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響及其機制研究

發(fā)布時間:2017-04-12 23:24

  本文關(guān)鍵詞:結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達對新疆地區(qū)耐藥結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響及其機制研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達對單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響。 方法:構(gòu)建及鑒定重組穿梭質(zhì)粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR,利用電穿孔技術(shù)將重組穿梭質(zhì)粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR分別電轉(zhuǎn)化至單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用實時熒光定量PCR技術(shù)等檢測及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用顯色法測定最小抑菌濃度,檢測及探討研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的變化。 結(jié)果:構(gòu)建及鑒定了重組質(zhì)粒pMV361-PloP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR,構(gòu)建及鑒定了結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用刃天青顯色法測定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的最小抑菌濃度,結(jié)果顯示過表達PhoP基因、過表達PhoR基因和過表達PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性均明顯提高。 結(jié)論:結(jié)核桿菌PhoP、PhoR和PhoPR基因過表達均可使單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性明顯提高,為進一步研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)對新疆地區(qū)結(jié)核桿菌耐藥性調(diào)控作用機制奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:結(jié)核桿菌 耐藥 利福平 PhoPR雙組分系統(tǒng)
【學位授予單位】:石河子大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R378
【目錄】:
  • 摘要7-8
  • Abstract8-9
  • 中英文縮略詞對照表9-10
  • 前言10-12
  • 材料和方法12-23
  • 1 材料12-15
  • 1.1 菌株12
  • 1.2 質(zhì)粒和載體12
  • 1.3 主要試劑12-13
  • 1.4 主要實驗儀器設(shè)備13-14
  • 1.5 主要試劑配制14-15
  • 2 實驗方法15-23
  • 2.1 構(gòu)建及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)重組質(zhì)粒15-20
  • 2.2 構(gòu)建及鑒定過表達PhoP基因、過表達PhoR基因和過表達PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株20-22
  • 2.3 檢測過表達PhoP基因、過表達PhoR基因和過表達PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的耐藥性22-23
  • 結(jié)果23-36
  • 1 構(gòu)建及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)重組質(zhì)粒23-33
  • 1.1 結(jié)核桿菌目的基因的PCR擴增23
  • 1.2 大腸桿菌的培養(yǎng)及抗生素篩選23-24
  • 1.3 目的基因連接T載體陽性克隆的PCR篩選24-25
  • 1.4 重組質(zhì)粒的酶切鑒定25-27
  • 1.5 重組質(zhì)粒的測序鑒定27-31
  • 1.6 目的基因連接質(zhì)粒pMV361陽性克隆的篩選31-32
  • 1.7 同源重組質(zhì)粒的酶切鑒定32-33
  • 2 構(gòu)建及鑒定過表達PhoP基因、過表達PhoR基因和過表達PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株33-35
  • 2.1 各過表達PhoPR雙組分系統(tǒng)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的構(gòu)建33-34
  • 2.2 利用Realtime-PCR技術(shù)鑒定各過表達單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株P(guān)hoP/PhoR mRNA表達量34-35
  • 3 檢測過表達PhoP基因、過表達PhoR基因和過表達PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的耐藥性35-36
  • 討論36-39
  • 結(jié)論39-40
  • 參考文獻40-42
  • 文獻綜述42-51
  • 摘要42
  • 1 結(jié)核病的發(fā)病機制和雙組分系統(tǒng)42-44
  • 1.1 組氨酸激酶(HK)44
  • 1.2 反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白(RR)44
  • 2 PhoPR在結(jié)核桿菌中的作用44-47
  • 2.1 PhoP基因44-45
  • 2.2 PhoP與ESAT-6和CFP-1045
  • 2.3 PhoP對毒力的作用45-46
  • 2.4 PhoP的交互作用46-47
  • 2.5 PhoP與結(jié)核桿菌持留性47
  • 2.6 PhoP突變株的細胞形態(tài)及體外生長要求47
  • 2.7 PhoPR-抗結(jié)核藥物的潛在目標47
  • 3 展望47-48
  • 參考文獻48-51
  • 附錄51-52
  • 致謝52-53
  • 作者簡介53-54
  • 導評閱表54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號:302315

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