本文關(guān)鍵詞：結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)對新疆地區(qū)耐藥結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響及其機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)對單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響。 方法：構(gòu)建及鑒定重組穿梭質(zhì)粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR,利用電穿孔技術(shù)將重組穿梭質(zhì)粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR分別電轉(zhuǎn)化至單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用實時熒光定量PCR技術(shù)等檢測及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用顯色法測定最小抑菌濃度,檢測及探討研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的變化。 結(jié)果：構(gòu)建及鑒定了重組質(zhì)粒pMV361-PloP、pMV361-PhoR和pMV361-PhoPR,構(gòu)建及鑒定了結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株,利用刃天青顯色法測定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的最小抑菌濃度,結(jié)果顯示過表達(dá)PhoP基因、過表達(dá)PhoR基因和過表達(dá)PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性均明顯提高。 結(jié)論：結(jié)核桿菌PhoP、PhoR和PhoPR基因過表達(dá)均可使單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性明顯提高,為進(jìn)一步研究結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)對新疆地區(qū)結(jié)核桿菌耐藥性調(diào)控作用機制奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)核桿菌 耐藥 利福平 PhoPR雙組分系統(tǒng)
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-9
• 中英文縮略詞對照表9-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-23
• 1 材料12-15
• 1.1 菌株12
• 1.2 質(zhì)粒和載體12
• 1.3 主要試劑12-13
• 1.4 主要實驗儀器設(shè)備13-14
• 1.5 主要試劑配制14-15
• 2 實驗方法15-23
• 2.1 構(gòu)建及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)重組質(zhì)粒15-20
• 2.2 構(gòu)建及鑒定過表達(dá)PhoP基因、過表達(dá)PhoR基因和過表達(dá)PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株20-22
• 2.3 檢測過表達(dá)PhoP基因、過表達(dá)PhoR基因和過表達(dá)PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的耐藥性22-23
• 結(jié)果23-36
• 1 構(gòu)建及鑒定結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)重組質(zhì)粒23-33
• 1.1 結(jié)核桿菌目的基因的PCR擴增23
• 1.2 大腸桿菌的培養(yǎng)及抗生素篩選23-24
• 1.3 目的基因連接T載體陽性克隆的PCR篩選24-25
• 1.4 重組質(zhì)粒的酶切鑒定25-27
• 1.5 重組質(zhì)粒的測序鑒定27-31
• 1.6 目的基因連接質(zhì)粒pMV361陽性克隆的篩選31-32
• 1.7 同源重組質(zhì)粒的酶切鑒定32-33
• 2 構(gòu)建及鑒定過表達(dá)PhoP基因、過表達(dá)PhoR基因和過表達(dá)PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株33-35
• 2.1 各過表達(dá)PhoPR雙組分系統(tǒng)的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的構(gòu)建33-34
• 2.2 利用Realtime-PCR技術(shù)鑒定各過表達(dá)單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株P(guān)hoP/PhoR mRNA表達(dá)量34-35
• 3 檢測過表達(dá)PhoP基因、過表達(dá)PhoR基因和過表達(dá)PhoPR基因的單純耐利福平的新疆地區(qū)結(jié)核桿菌臨床分離株的耐藥性35-36
• 討論36-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-42
• 文獻(xiàn)綜述42-51
• 摘要42
• 1 結(jié)核病的發(fā)病機制和雙組分系統(tǒng)42-44
• 1.1 組氨酸激酶(HK)44
• 1.2 反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白(RR)44
• 2 PhoPR在結(jié)核桿菌中的作用44-47
• 2.1 PhoP基因44-45
• 2.2 PhoP與ESAT-6和CFP-1045
• 2.3 PhoP對毒力的作用45-46
• 2.4 PhoP的交互作用46-47
• 2.5 PhoP與結(jié)核桿菌持留性47
• 2.6 PhoP突變株的細(xì)胞形態(tài)及體外生長要求47
• 2.7 PhoPR-抗結(jié)核藥物的潛在目標(biāo)47
• 3 展望47-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 附錄51-52
• 致謝52-53
• 作者簡介53-54
• 導(dǎo)評閱表54

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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  本文關(guān)鍵詞：結(jié)核桿菌PhoPR雙組分系統(tǒng)過表達(dá)對新疆地區(qū)耐藥結(jié)核桿菌臨床分離株耐藥性的影響及其機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：302315