在分析FMDV抗原表位和免疫特性的基礎(chǔ)上,結(jié)合FMD的流行特點(diǎn),設(shè)計(jì)了O型FMDV復(fù)合表位與CTB的融合基因CTB-Th2-VP1和CTB-VP1-2A-Epi,將其克隆入表達(dá)載體pGEX-6P-1,在BL21中獲得誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)的融合蛋白以包涵體形式存在,具有O型FMDV和CTB雙重反應(yīng)原性。融合蛋白復(fù)性后具有CTB的生物活性,腹腔接種小鼠后可誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性的體液、細(xì)胞和黏膜免疫,其中CTB-VP1-2A-Epi融合蛋白產(chǎn)生的免疫水平高于或接近滅活疫苗。將CTB-VP1-2A-Epi融合基因克隆到枯草芽孢桿菌表達(dá)載體pBC38C中,構(gòu)建了CTB-VP1-2A-Epi重組枯草芽孢桿菌,免疫小鼠可產(chǎn)生O型FMDV特異性的細(xì)胞免疫和黏膜免疫。將重組枯草芽孢桿菌與重組雞痘病毒vUTAL3CP1、核酸疫苗pIRES3CP1及O型FMDV滅活苗以不同的組合方式聯(lián)合免疫小鼠。結(jié)果顯示,重組枯草芽孢桿菌能夠增強(qiáng)這三種疫苗的免疫效果,其中以核酸疫苗首免、重組雞痘病毒加強(qiáng)免疫,結(jié)合重組枯草芽孢桿菌灌服的免疫策略的免疫效果最佳,可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生較高水平的細(xì)胞免疫、體液免疫和黏膜免疫。研究結(jié)果表明設(shè)計(jì)和表達(dá)的... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：201 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
提要
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 動(dòng)物新型疫苗研究進(jìn)展
        1 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)與新型疫苗研究
        2 新型免疫原與疫苗
        3 載體與疫苗
        4 結(jié)語(yǔ)
    第二章 霍亂毒素研究進(jìn)展
        1 CT 的結(jié)構(gòu)特性
        2 CTB 黏膜免疫佐劑研究
        3 小結(jié)
    第三章 口蹄疫疫苗研究進(jìn)展
        1 口蹄疫傳統(tǒng)疫苗研究
        2 口蹄疫新型疫苗研究
        3 展望
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 O 型FMDV 復(fù)合表位與CTB 融合基因的分子設(shè)計(jì)
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第二章 O 型FMDV 復(fù)合表位與CTB 融合基因的構(gòu)建與表達(dá)
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第三章 O 型FMDV 復(fù)合表位與CTB 融合蛋白的實(shí)驗(yàn)免疫
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第四章 O 型FMDV 復(fù)合表位/CTB 重組枯草芽孢桿菌 構(gòu)建與實(shí)驗(yàn)免疫
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第五章 O 型FMDV 復(fù)合表位/CTB 重組枯草芽孢桿菌 與多種FMDV 基因重組體聯(lián)合實(shí)驗(yàn)免疫
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
博士期間發(fā)表論文
中文摘要
Abstract
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
CURRICULUM VITAE


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]綠色熒光蛋白基因在枯草芽孢桿菌中的表達(dá)[J]. 陳曉月,金寧一,海洋,鄒偉,馬海利,李昌.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2008(02)
[2]口蹄疫病毒復(fù)合多表位DNA疫苗的設(shè)計(jì)及構(gòu)建[J]. 馬鳴瀟,金寧一,劉慧娟,魯會(huì)軍,田明堯,金明蘭,沈國(guó)順,張林,李旭,計(jì)越,金擴(kuò)世.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2007(03)
[3]流感復(fù)合多表位疫苗的設(shè)計(jì)及小鼠免疫研究[J]. 賈雷立,金寧一,魯會(huì)軍,金洪濤,王瑞琳,田明堯,陳義峰,鄭敏,李昌,李霄,馬明瀟,金擴(kuò)世.  廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué). 2006(S1)
[4]以乳酸桿菌為載體的口蹄疫病毒VP1基因DNA疫苗豬體免疫試驗(yàn)[J]. 李云崗,田夫林,王會(huì)波,馬慧玲,陳靜,李新生,高鳳山,夏春.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2006(08)
[5]口蹄疫病毒重組雞痘病毒活載體疫苗和DNA疫苗免疫牛的試驗(yàn)研究[J]. 鄭敏,金寧一,秦曉冰,金擴(kuò)世,劉棋,田明堯,郭建順,徐敬龍,李昌.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2006(02)
[6]口蹄疫抗原決定簇融合基因轉(zhuǎn)化水稻的研究[J]. 倪志華,張紅心,王鳴剛,陳亮.  廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(S1)
[7]口蹄疫抗原決定簇融合基因轉(zhuǎn)化胡蘿卜的研究[J]. 李文建,沈明山,李春江,陳亮.  廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(S1)
[8]O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的構(gòu)建及原核表達(dá)[J]. 鄭敏,金寧一,魯會(huì)軍,韓松,金擴(kuò)世,李昌.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(06)
[9]共表達(dá)口蹄疫病毒衣殼蛋白前體P1-2A基因和蛋白酶3C基因重組雞痘病毒的構(gòu)建及其免疫原性[J]. 金寧一,張洪勇,尹革芬,鄭敏,劉彤,江文正,李子健.  科學(xué)通報(bào). 2004(06)
[10]PELA microspheres loaded H.pylori lysates and their mucosal immune response[J]. Jian-Min Ren Quan-Ming Zou Fu-Kun Wang Wen-Knn Zen,Faculty of Medical Laboratory Science,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Qiang He Wei Chen,Department of Radiology,southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China.  World Journal of Gastroenterology. 2002(06)



本文編號(hào)：3021840