分泌IL-10的B細(xì)胞誘導(dǎo)Tregs細(xì)胞的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-24 22:43
目的 探討分泌白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-10的B細(xì)胞誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Tregs)轉(zhuǎn)化的機(jī)制。方法 免疫磁珠法分離C57BL/6J小鼠脾臟B細(xì)胞,CD40L抗體刺激B細(xì)胞48 h,培養(yǎng)43 h時(shí),向培養(yǎng)液中加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)+佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)+離子霉素+莫能霉素,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)IL-10 mRNA表達(dá)水平。免疫磁珠法分離C57BL/6J小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞,根據(jù)培養(yǎng)條件不同,將細(xì)胞分成四組,對(duì)照(Control)組;共培養(yǎng)(Co-culture)組;非接觸培養(yǎng)(Transwell)組;IL-10拮抗(Anti-IL-10)組。培養(yǎng)72 h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+CD25+Foxp3+的百分比,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA...
【文章來(lái)源】:國(guó)際免疫學(xué)雜志. 2019,(03)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
本文編號(hào):2998063
【文章來(lái)源】:國(guó)際免疫學(xué)雜志. 2019,(03)
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