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HPV16、18、58型多價(jià)重組痘苗病毒構(gòu)建及免疫效果研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-24 05:23
  宮頸癌是危及全球婦女健康的嚴(yán)重疾病,在世界范圍內(nèi)發(fā)病率居女性惡性腫瘤第二位。宮頸刮片的篩查和疾病的治療給人們帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。大量的流行病學(xué)、分子生物學(xué)、病毒學(xué)和臨床研究證實(shí),宮頸癌及癌前病變的發(fā)生與高危型人乳頭瘤病毒(HumanPapillomavirus,HPV)持續(xù)感染密切相關(guān)。宮頸癌病人的宮頸樣本中可以檢測(cè)到的HPV高危型別包括HPV16,18,45,31,33,58,52,35,59,56等,其中HPV16的檢出率最高,其它高危型別在不同國家和地區(qū)檢出率不同。我國宮頸癌患者中HPV16感染率最高為61.9%,居第二位和第三位的分別為HPV18(7.7%)和HPV58(6.4%)。因此,研制適用于我國包括HPV16、HPV18、HPV58等主要高危型別的多價(jià)治療性疫苗,對(duì)HPV重度感染及相關(guān)腫瘤的人群治療具有重要意義。HPVE6、E7蛋白持續(xù)在腫瘤細(xì)胞中表達(dá),是形成腫瘤并維持惡性特征所必需的癌蛋白,正常組織中不存在這兩種蛋白,因此E6和E7蛋白是目前HPV相關(guān)的宮頸癌及癌前病變治療性疫苗的主要靶抗原。為安全起見,通常以修飾后去除了轉(zhuǎn)化活性但仍保留抗原性的E6和E7蛋白作為靶... 

【文章來源】:中國疾病預(yù)防控制中心北京市

【文章頁數(shù)】:131 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
    第一部分 HPV16、HPV18、HPV58三個(gè)型別E6、E7抗原及相應(yīng)抗體的制備和ELISA檢測(cè)方法的建立
        1.HPV18型、HPV58型E6、E7基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)及鑒定
        2.HPV16、HPV18、HPV58三個(gè)型別E6、E7蛋白的純化
        3.HPV16、HPV18、HPV58三個(gè)型別E6、E7蛋白相應(yīng)抗體的制備
        4.ELISA檢測(cè)方法的建立
        小結(jié)
    第二部分 表達(dá)E7E6融合蛋白的HPV18型、HPV58型和HPV16/18型重組痘苗病毒的構(gòu)建及鑒定
        1.HPV16型、HPV18型和HPV58 E7E6目的基因的改造、克隆及鑒定
        2.HPV18型、HPV58型和HPV16/18型E7E6基因痘苗病毒重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定
        3.表達(dá)HPV18型、HPV58型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒構(gòu)建及鑒定
        4.共表達(dá)HPV16/18型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒構(gòu)建及鑒定
        討論
        小結(jié)
    第三部分 重組痘苗病毒的免疫效果研究
        1.表達(dá)HPV16型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒免疫效果評(píng)價(jià)
            1.1 體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測(cè)
            1.2 抗TC-1腫瘤細(xì)胞免疫效果評(píng)價(jià)
        2.表達(dá)HPV58型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒免疫效果評(píng)價(jià)
            2.1 RMAHPV58E7腫瘤細(xì)胞系的鑒定及荷瘤小鼠模型的建立
            2.2 體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測(cè)
            2.3 抗RMAHPV58E7腫瘤細(xì)胞免疫效果
        3.表達(dá)HPV18型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒免疫效果評(píng)價(jià)
        4.共表達(dá)HPV16/18型E7E6融合蛋白的雙價(jià)重組痘苗病毒免疫效果評(píng)價(jià)
            4.1 重組痘苗病毒在小鼠上的免疫效果評(píng)價(jià)
            4.2 重組痘苗病毒在恒河猴上的免疫效果評(píng)價(jià)
        5.共表達(dá)HPV16/18型E7E6融合蛋白的重組痘苗病毒與表達(dá)HPV58型E7E6融合蛋白重組痘苗病毒聯(lián)合免疫效果評(píng)價(jià)
            5.1 體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測(cè)
            5.2 抗TC-1腫瘤細(xì)胞免疫效果評(píng)價(jià)
            5.3 抗RMAHPV58E7腫瘤細(xì)胞免疫效果評(píng)價(jià)
        討論
        小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國婦女子宮頸人乳頭瘤病毒型別分布的Meta分析[J]. 鮑彥平,李霓,王鶴,喬友林.  中華流行病學(xué)雜志. 2007(10)
[2]人乳頭狀瘤病毒16型不同基因疫苗聯(lián)合免疫的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 范江濤,趙莉,陳心秋,任皎,張卉,阮力,田厚文.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2006(06)
[3]HPV58型E7基因重組痘苗疫苗免疫保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 羅利群,李潔,劉繡,張友會(huì).  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2003(01)



本文編號(hào):2996656

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