三種不同來源間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力的比較研究
本文關(guān)鍵詞:三種不同來源間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力的比較研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究背景及目的: 間充質(zhì)干細(xì)胞已用于臨床組織損傷修復(fù)、自身免疫系統(tǒng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的試驗治療。但是間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)量差異及來源的不同成為制約干細(xì)胞臨床應(yīng)用的主要問題。雖然間充質(zhì)干細(xì)胞可由多種組織獲得,但是對不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力尚缺乏系統(tǒng)研究。本實驗對臍帶、脂肪、骨髓三種不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的體外擴(kuò)增能力及增殖相關(guān)基因表達(dá)水平進(jìn)行了較為系統(tǒng)的比較研究,旨在為解決臨床應(yīng)用間充質(zhì)干細(xì)胞的來源問題提供依據(jù)。方法: 應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)水平及誘導(dǎo)細(xì)胞成脂、成骨分化能力來對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行鑒定;通過細(xì)胞計數(shù)、BrdU摻入實驗及細(xì)胞周期分析判定細(xì)胞的增殖能力;應(yīng)用實時定量RT-PCR技術(shù)分析增殖相關(guān)基因的表達(dá)水平。結(jié)果: 三種不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在體外培養(yǎng)中的傳代能力有明顯差別。UC-MSCs可以培養(yǎng)到37代,AT-MSCs可以培養(yǎng)到29代,而BM-MSCs只能培養(yǎng)到17代,細(xì)胞培養(yǎng)到高代次時仍表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志。而且UC-MSCs增殖速度在三者中為最快,AT-MSCs次之,BM-MSCs增殖速度最慢。截止細(xì)胞傳至第15代的分析顯示,UC-MSCs總細(xì)胞數(shù)量是AT-MSCs的1208倍,是BM-MSCs的84549倍。BrdU實驗結(jié)果顯示BrdU摻入量由多到少分別是UC-MSCs,AT-MSCs,BM-MSCs。細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示,UC-MSCs的增殖指數(shù)最高,AT-MSCs次之,而BM-MSCs最低。實時定量RT-PCR研究結(jié)果顯示,增殖相關(guān)基因在UC-MSCs中表達(dá)量最高,其次是AT-MSCs,BM-MSCs最低。結(jié)論: 1.成功分離培養(yǎng)臍帶、脂肪、骨髓三種不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞。 2.臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外長期傳代能力最強(qiáng),脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞次之,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外長期傳代能力最差。 3.三種間充質(zhì)干細(xì)胞傳代到高代次時,,仍然保持干細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)。 4.臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長速度快,增殖能力強(qiáng),是較理想的間充質(zhì)干細(xì)胞來源之一,有希望成為臨床應(yīng)用干細(xì)胞的主要來源。
【關(guān)鍵詞】:間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-8
- 英文單詞縮寫8-10
- 第1章 綜述10-14
- 1.1 MSCs 的生物學(xué)特性10-11
- 1.2 MSCs 的功能11-12
- 1.3 MSCs 的臨床應(yīng)用前景12-14
- 第2章 實驗部分14-34
- 第1節(jié) 間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定14-21
- 1 實驗材料14-15
- 2 實驗方法15-18
- 3 實驗結(jié)果18-21
- 第2節(jié) 三種間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖能力21-34
- 1 實驗材料21
- 2 實驗方法21-27
- 3 實驗結(jié)果27-34
- 第3章 討論34-37
- 第4章 結(jié)論37-38
- 參考文獻(xiàn)38-43
- 作者簡介及在校期間所獲科研成果43-44
- 致謝44
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