人促血液血管生成素（Hemangiopoietin，HAPO）最初是從再生障礙性貧血病人的尿中分離鑒定出的對巨核細胞增殖有促進作用的蛋白。在它的氨基末端有兩個富含半胱氨酸的促細胞生成素B同源區(qū)（Somatomedin BHomology，SMB）和一個肝素結(jié)合區(qū)。用已知HAPO序列到基因庫中作同源性分析（BLAST），發(fā)現(xiàn)與蛋白多糖4（Proteoglycan 4，PRG4）同源性很高。文獻推測HAPO和關(guān)節(jié)軟骨淺表層蛋白（Articular cartilage superficial zone protein，SZP）都為蛋白多糖4的不同的剪接體，其基因的染色體定位在1q24-25。實驗中發(fā)現(xiàn)，它對血液干／祖細胞和血管內(nèi)皮細胞均有促增殖的作用，具體的作用機制目前還不十分清楚。 為了進一步研究HAPO的生物學功能，我們以RT-PCR方法，從人的胎肝細胞的總RNA中擴增出HAPO的cDNA。經(jīng)測序證實后插入融合表達載體pET32c中，并實現(xiàn)在大腸桿菌BL21（DE3）中的可溶性表達，再經(jīng)DEAE Sepharose Fast Flow陰離子交換柱、Ni-Chelating Seph... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

19.HAPO的染色體定位MaPofHAPO

HAPO多克隆抗體檢測的雙擴圖

圖3.2DEAE離子柱層析后SDS.PAGE圖ig.3.2SDS一PAGEnaalysisofht一HAPOer;2，TotalPorteinofE.Coli;3.4.UnbindingPortionPekaeontainedufsionPortein:7.otherelutionngSepharoseFF柱層析達的融合HAPO的硫氧還蛋白的后面含有應(yīng)用了親和柱一鎳柱，鎳柱的結(jié)果見圖雜蛋白，12OMm咪啤洗脫下了含目的4)表明蛋白得到了進一步的純化。由于形洗脫不能應(yīng)用，可用不同的咪哇濃度

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2975476