小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因調(diào)控的研究
發(fā)布時間:2021-01-10 23:06
越來越多的證據(jù)表明:細(xì)胞凋亡是精子發(fā)生過程中生精細(xì)胞主動退化的機(jī)制,而激素、溫度等都是生精細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因素。但是,這些細(xì)胞外的調(diào)節(jié)因素,必須激活生精細(xì)胞內(nèi)部某些基因的轉(zhuǎn)錄、表達(dá),才能誘導(dǎo)細(xì)胞這種主動自殺行為。目前,雖然生精細(xì)胞凋亡的研究已成為一個熱點(diǎn),但從基因水平上研究生精細(xì)胞凋亡的報道還比較少。本實(shí)驗(yàn)的研究目的,即是想通過在體和離體的實(shí)驗(yàn),探討細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)基因bcl-2、bax及hsp70基因是否參與生精細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)以及怎樣調(diào)節(jié)生精細(xì)胞凋亡,為更深入地探索生精細(xì)胞主動退化的分子機(jī)制提供一些基礎(chǔ)理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 首先,我們通過將成年小鼠的睪丸推入腹腔,然后縫合單側(cè)腹股溝管的方式,建立了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)隱睪誘導(dǎo)生精細(xì)胞凋亡的模型。結(jié)果發(fā)現(xiàn):隱睪術(shù)后6-15d,術(shù)側(cè)睪丸重量明顯下降,與對照例有顯著差異(P<0.01)。組織學(xué)觀察顯示:術(shù)后6-15d,一些生精細(xì)胞剝脫至管腔,生精上皮變薄不完整,空化現(xiàn)象明顯,大量生精細(xì)胞丟失,成熟精子明顯減少甚至消失,一部分生精細(xì)胞的核染色質(zhì)濃縮,明顯邊集化,呈環(huán)狀,出現(xiàn)典型的細(xì)胞凋亡特征。管腔中出現(xiàn)“多核巨細(xì)胞”(Multinucleated ...
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:107 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
對照及實(shí)驗(yàn)隱辛組織切片HE染色,、200FigZ:PhotomieorgraPhofserotalnadehryPtocrhidismtestisseetions,H&Estainx200A:SerotaltestisC:CyrPtorehidtestisofsdB:CyrPtorehidtestisof6dD:CyrPtoerhidtestisoof1od
Fig4(D)圖4:辛丸組織切片的TUNELg4:Tl刀,ELstainingoftesticulartissuesections·fluoreseenee.xZOOA:SerotaltestisC:CyrPtocrhidtestisofsd染色,x200PositivestainingPaPearsgerenB:CyrPtoerhidtestisof6dD:CryPtorehidtestisof1od
為2士1.37(2)細(xì)胞凋亡百分比結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組比對照組凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增加(圖7),41℃培養(yǎng)30mni和hl之間也有顯著差異(P<0.05)表6培養(yǎng)細(xì)胞凋亡百分比Table6PereentageofaPoPtotieseParatedeultureeell33,C培養(yǎng)41℃培養(yǎng)30min41℃培養(yǎng)lh精原細(xì)胞個別7.8士2.320.6土9.4#精母細(xì)胞<2%17.4士8.731.3士11.2#,精子細(xì)胞個別15.8土.782.64士9.1##P<0.05VS41,C培養(yǎng)30min五、DNA凝膠電泳l、組織DNA凝膠電泳隱辛術(shù)后6、8、10d可見“DNAladder,,圖譜,顯示有DNA斷裂的小片段存在,而相應(yīng)的對照側(cè)、隱辛術(shù)后d3及正常小鼠辜丸沒有觀察到小片斷DNA(圖8).2、細(xì)胞DNA凝膠電泳混合細(xì)胞加溫培養(yǎng)30min,lh后
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]睪丸生殖細(xì)胞凋亡的調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 朱海東. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 1997(01)
[2]程序化細(xì)胞死亡與腫瘤[J]. 方敏,薛紹白. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 1994(03)
本文編號:2969584
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:107 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
對照及實(shí)驗(yàn)隱辛組織切片HE染色,、200FigZ:PhotomieorgraPhofserotalnadehryPtocrhidismtestisseetions,H&Estainx200A:SerotaltestisC:CyrPtorehidtestisofsdB:CyrPtorehidtestisof6dD:CyrPtoerhidtestisoof1od
Fig4(D)圖4:辛丸組織切片的TUNELg4:Tl刀,ELstainingoftesticulartissuesections·fluoreseenee.xZOOA:SerotaltestisC:CyrPtocrhidtestisofsd染色,x200PositivestainingPaPearsgerenB:CyrPtoerhidtestisof6dD:CryPtorehidtestisof1od
為2士1.37(2)細(xì)胞凋亡百分比結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組比對照組凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增加(圖7),41℃培養(yǎng)30mni和hl之間也有顯著差異(P<0.05)表6培養(yǎng)細(xì)胞凋亡百分比Table6PereentageofaPoPtotieseParatedeultureeell33,C培養(yǎng)41℃培養(yǎng)30min41℃培養(yǎng)lh精原細(xì)胞個別7.8士2.320.6土9.4#精母細(xì)胞<2%17.4士8.731.3士11.2#,精子細(xì)胞個別15.8土.782.64士9.1##P<0.05VS41,C培養(yǎng)30min五、DNA凝膠電泳l、組織DNA凝膠電泳隱辛術(shù)后6、8、10d可見“DNAladder,,圖譜,顯示有DNA斷裂的小片段存在,而相應(yīng)的對照側(cè)、隱辛術(shù)后d3及正常小鼠辜丸沒有觀察到小片斷DNA(圖8).2、細(xì)胞DNA凝膠電泳混合細(xì)胞加溫培養(yǎng)30min,lh后
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]睪丸生殖細(xì)胞凋亡的調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 朱海東. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 1997(01)
[2]程序化細(xì)胞死亡與腫瘤[J]. 方敏,薛紹白. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 1994(03)
本文編號:2969584
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