單克隆抗體在生物制藥領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。單克隆抗體不僅自身能夠作為免疫調(diào)節(jié)分子應(yīng)用于一些免疫系統(tǒng)紊亂性疾病,也可以作為靶向性載體將藥物特異性地傳輸至目標(biāo)靶點(diǎn)。DEC-205作為樹(shù)突狀細(xì)胞（Dentritic cells, DC）表面的模式識(shí)別受體（Pattern Recognition Receptors, PRRs）,能夠特異性的捕獲抗原分子,加工遞呈給機(jī)體免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)免疫反應(yīng)�？笵EC-205單克隆抗體能夠有效的增強(qiáng)這一過(guò)程。體外實(shí)驗(yàn)表明,經(jīng)過(guò)DEC-205靶向抗體輔助的抗原遞呈效率能夠增強(qiáng)1000倍。DEC-205單克隆抗體做為載體在慢性感染性疾病及癌癥等的免疫治療中有巨大的應(yīng)用前景。我們通過(guò)免疫大鼠進(jìn)行細(xì)胞融合的方法得到一株抗人DEC-205分子的單克隆抗體1-17-2。經(jīng)過(guò)抗體亞型分析,鑒定該抗體為大鼠IgG1、Kappa亞型。該抗體能夠識(shí)別人樹(shù)突狀細(xì)胞表面DEC-205分子,并誘導(dǎo)DC細(xì)胞對(duì)抗體的內(nèi)吞效應(yīng)。我們通過(guò)ImageStream儀器檢測(cè)到1-17-2抗體一旦與DC細(xì)胞結(jié)合,會(huì)引起DC細(xì)胞的內(nèi)吞現(xiàn)象。該抗體作為載體能夠應(yīng)用于各種慢性感染性疾病及癌癥等的免疫治療中。然... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 引言
    1.1 DEC-205分子簡(jiǎn)介
        1.1.1 DEC-205作為抗原識(shí)別受體的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 DEC-205抗原遞呈途徑的研究
    1.2 DEC-205靶向抗體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制
        1.2.1 DEC-205靶向抗體在靜息狀態(tài)下誘導(dǎo)免疫耐受
        1.2.2 DEC-205靶向抗體在共刺激信號(hào)下增強(qiáng)免疫反應(yīng)
        1.2.3 DEC-205靶向抗體遞呈抗原途徑的選擇
        1.2.4 DEC-205靶向抗體刺激HIV患者細(xì)胞免疫應(yīng)答
    1.3 抗體人源化方法綜述
        1.3.1 基于理性化設(shè)計(jì)的抗體人源化方法
        1.3.2 基于經(jīng)驗(yàn)的抗體人源化方法
    1.4 分子模擬技術(shù)在生物學(xué)中的應(yīng)用
        1.4.1 分子模擬技術(shù)的理論基礎(chǔ)
        1.4.2 同源建模的原理與方法
        1.4.3 分子動(dòng)力學(xué)模擬的原理與方法
        1.4.4 分子對(duì)接的原理與方法
第二章 抗DEC-205單克隆抗體的制備及表達(dá)檢測(cè)體系的建立
    2.1 前言
    2.2 材料方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 DEC-1和DEC-S抗原表達(dá)
        2.3.2 大鼠免疫以及抗體制備
        2.3.3 1-17-2單克隆抗體亞型的鑒定
        2.3.4 1-17-2單克隆抗體識(shí)別人DC細(xì)胞
        2.3.5 1-17-2抗體誘導(dǎo)DC內(nèi)吞現(xiàn)象
        2.3.6 1-17-2抗體基因克隆及序列分析
        2.3.7 1-17-2抗體的體外重組表達(dá)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 DEC-205單克隆抗體的人源化改造
    3.1 前言
    3.2 材料方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 抗體可變區(qū)序列分析
        3.3.2 1-17-2 Fab模型的構(gòu)建
        3.3.3 人源化改造整體策略
        3.3.4 基于表位掃描的人源化替換
        3.3.5 人源化抗體的構(gòu)建及親和力檢測(cè)
        3.3.6 人源化抗體的優(yōu)化策略
        3.3.7 人源化替換突變體模型的構(gòu)建
        3.3.8 關(guān)鍵位點(diǎn)氨基酸的確定
        3.3.9 關(guān)鍵位點(diǎn)氨基酸的分析
        3.3.10 優(yōu)化抗體的構(gòu)建及親和力檢測(cè)
        3.3.11 優(yōu)化抗體誘導(dǎo)DC的內(nèi)吞現(xiàn)象
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 1-17-2 Fab與DEC-S結(jié)合位點(diǎn)的分析
    4.1 前言
    4.2 材料方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 DEC-S模型的構(gòu)建及退火模擬
        4.3.2 DEC-S的結(jié)構(gòu)模型及其評(píng)估
        4.3.3 DEC-S與1-17-2 Fab的分子對(duì)接
        4.3.4 抗原抗體復(fù)合物結(jié)合位點(diǎn)的分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]幾類蛋白的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及分子對(duì)接的理論研究[D]. 張媛.吉林大學(xué) 2005



本文編號(hào)：2958037