運(yùn)用點(diǎn)突變試劑盒構(gòu)建pcDNA3.1-YFP-H148Q/V163真核表達(dá)載體,脂質(zhì)體介導(dǎo)YFP-H148Q/V163S轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達(dá)Ano1的FRT細(xì)胞,熒光淬滅動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)檢測YFP-H148Q/V163S對(duì)其氯離子的敏感性。測序結(jié)果顯示,YFP（yellow fluorescent protein）特異編碼序列上第508-510位堿基CAC突變?yōu)镃AG,148位組氨酸H突變?yōu)楣劝滨０稱;第553-555位堿基GTG突變?yōu)锳GC,163位纈氨酸V突變?yōu)榻z氨酸S。熒光淬滅動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示,向表達(dá)YFP-H148Q/V163S的FRT細(xì)胞加入Anol激活劑ionomycin和Cl^-,其相對(duì)熒光強(qiáng)度明顯下降。pcDNA3.1-YFP-H148Q/V163真核表達(dá)載體成功構(gòu)建,并證實(shí)表達(dá)于FRT胞漿中的YFP-H148Q/V163S具有對(duì)氯離子敏感的特性。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)雜志. 2015年11期 北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2955511