甘露聚糖結(jié)合凝集素調(diào)節(jié)THP1/CD14細(xì)胞細(xì)胞因子分泌機(jī)制的初步探索
發(fā)布時(shí)間:2020-12-25 23:02
盡管近年來天然免疫研究進(jìn)展十分迅速,但是天然免疫的本質(zhì)亟待揭示和闡明。隨著Janeway CA Jr等提出天然免疫通過模式識(shí)別作用啟動(dòng)獲得性免疫應(yīng)答并左右其應(yīng)答類型的假說,模式識(shí)別分子成為了免疫學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。模式識(shí)別分子是天然免疫的重要分子,根據(jù)其存在的形式,可分為可溶性和細(xì)胞膜表面兩大類。已經(jīng)發(fā)現(xiàn),膜相模式識(shí)別受體中Toll樣受體家族(Toll-likereceptors,TLR)、巨噬細(xì)胞甘露糖受體(macrophage mannose recetor,MR)和可溶性模式識(shí)別分子中的膠凝素(collectins)家族成員肺表面活性物質(zhì)脫輔基蛋白A和D(surfactant protein A、surfactant protein D,SP-A、SP-D)等是連接天然免疫與獲得性免疫的橋梁。天然免疫模式識(shí)別作用正直逼免疫應(yīng)答的核心問題——應(yīng)答的啟動(dòng)及其調(diào)控。甘露聚糖結(jié)合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)與SP-A、SP-D同屬于膠凝素家族,主要由肝細(xì)胞分泌,作為糖蛋白存在于血漿中。MBL的一級(jí)結(jié)構(gòu)至高級(jí)結(jié)構(gòu)均與補(bǔ)體分子C1q高度同源。MBL的主要功能區(qū)有...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
·2Clq或抗ClqR單克隆抗體不能抑制MBL與THpl/CD14細(xì)胞結(jié)合Fig·2·2Clqoranti·ClqRmAbcan’tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells
己。:寫吸卜JodO笆.u﹄山產(chǎn)了/廠Z/了/圖2一l糖對(duì)MBL與THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合的影響Fig·2· 1TheinnueneeofcarbohydratesinthebindingofMBLtoTHPI/CD14eells *P<0.05vseonrrolgrouP叁昌ABQ幻護(hù)功已.6孚八腸O寧﹄尹侶.勺」分了l、凳丁店I‘,叢。了…,lf、帕,護(hù)仙’ !r10,!O‘氏‘礴I‘..’護(hù)川1日”‘祝圖2· 2Clq或抗ClqR單克隆抗體不能抑制MBL與THpl/CD14細(xì)胞結(jié)合Fig·2· 2Clqoranti· ClqRmAbcan’ tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells A:PreineubationwithClq(30mg/L):B:PreincubationWithanti一 ClqRPmAb(30mg/L); grayshadow:unmarkedMBL:dashline:FITC一 MBL;solidline:inhibitorsandFITC一MBL 2.2.5MBL結(jié)構(gòu)域蛋白可部分抑制MBL與 THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合單獨(dú)預(yù)加;hMBLCRD蛋白或thMBLCLR蛋白都能部分抑制MBL’,THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合,而聯(lián)合應(yīng)用rhMBL-CRD蛋白和:hMBL一CLR蛋自貝IJ,J丁完全抑制MBL與 THPI/CD14細(xì)胞的結(jié)合(圖2一3)?
201052.51.250.63C皿eenti加 tionofhIBL(朔嗯拼L)圖3一 5Cell一ELISA分析:TLR-2對(duì)MBL與LPS刺激的THPllCD14細(xì)胞的結(jié)合的抑制Fig·3一 5AnalysisoftheinflueneeofsTLR一 2tothebindingofMBLtoLPSstimulated THPllCD14byCell一ELISA200口如100.師7石.如50日如2石口如10日如圖3七LPS增強(qiáng)THHICD14細(xì)胞 TLR-2TLR礴mRNA的表達(dá)Fig.3一 LPSenhaneedtheexp鄺 ssionofTLR一 2andTLR-4mRNAonTHPllCD14hyRT-PCR- M:DNAmarker:l一3:TLR一2mRNA’.l:no一 LPS:2:LPSZh:3:LPS24h:4場:TLR一4m朋A.4:non一 Lps;5:LpsZh:6:Lps24h;7:9:p一 actinmRNA·7:non一 Lps:8:LpsZh:9:Lps24h 3.2.4MBL抑制LPS刺激的THPI/CD14細(xì)胞Nr一比的轉(zhuǎn)位 westemboh結(jié)果顯示,在轉(zhuǎn)移了核蛋白的PvD膜上,細(xì)胞對(duì)照組僅能見到極淺的目的蛋白條帶,LPS刺激組(培養(yǎng)液中加入100林g/L的LPS,培養(yǎng) 60min)蛋白條帶明顯增粗,MBL組(培養(yǎng)液中加入100林g/L的LPs與10m叭MBL,培養(yǎng) 60min)蛋白條帶有所減弱(圖3一7)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人MBL-CLR表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 蔡學(xué)敏,左大明,趙娜,張麗蕓,陳政良. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2007(01)
[2]MBL對(duì)LPS誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟的調(diào)節(jié)作用[J]. 陳月,余新沛,劉瑩,陳政良. 免疫學(xué)雜志. 2006(04)
[3]MBL對(duì)LPS刺激的不同分化和活化狀態(tài)THP1/CD14細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α和IL-12的影響[J]. 陳月,余新沛,盧曉,陳政良. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2006(05)
[4]MBL對(duì)樹突狀細(xì)胞體外分化成熟的影響[J]. 陳月,陳政良,左大明,裘毅剛,張麗蕓. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(02)
[5]人血漿中MBL-MASP復(fù)合物的純化與分離[J]. 陳月,張麗蕓,陳政良. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(12)
[6]哺乳類C型凝集素超級(jí)家族[J]. 陳政良. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1997(06)
[7]甘露聚糖結(jié)合蛋白基因突變引起的免疫缺陷[J]. 陳政良. 生命的化學(xué)(中國生物化學(xué)會(huì)通訊). 1997(04)
[8]甘露聚糖結(jié)合蛋白[J]. 陳政良. 國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊). 1997(01)
本文編號(hào):2938546
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
·2Clq或抗ClqR單克隆抗體不能抑制MBL與THpl/CD14細(xì)胞結(jié)合Fig·2·2Clqoranti·ClqRmAbcan’tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells
己。:寫吸卜JodO笆.u﹄山產(chǎn)了/廠Z/了/圖2一l糖對(duì)MBL與THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合的影響Fig·2· 1TheinnueneeofcarbohydratesinthebindingofMBLtoTHPI/CD14eells *P<0.05vseonrrolgrouP叁昌ABQ幻護(hù)功已.6孚八腸O寧﹄尹侶.勺」分了l、凳丁店I‘,叢。了…,lf、帕,護(hù)仙’ !r10,!O‘氏‘礴I‘..’護(hù)川1日”‘祝圖2· 2Clq或抗ClqR單克隆抗體不能抑制MBL與THpl/CD14細(xì)胞結(jié)合Fig·2· 2Clqoranti· ClqRmAbcan’ tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells A:PreineubationwithClq(30mg/L):B:PreincubationWithanti一 ClqRPmAb(30mg/L); grayshadow:unmarkedMBL:dashline:FITC一 MBL;solidline:inhibitorsandFITC一MBL 2.2.5MBL結(jié)構(gòu)域蛋白可部分抑制MBL與 THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合單獨(dú)預(yù)加;hMBLCRD蛋白或thMBLCLR蛋白都能部分抑制MBL’,THPI/CD14細(xì)胞結(jié)合,而聯(lián)合應(yīng)用rhMBL-CRD蛋白和:hMBL一CLR蛋自貝IJ,J丁完全抑制MBL與 THPI/CD14細(xì)胞的結(jié)合(圖2一3)?
201052.51.250.63C皿eenti加 tionofhIBL(朔嗯拼L)圖3一 5Cell一ELISA分析:TLR-2對(duì)MBL與LPS刺激的THPllCD14細(xì)胞的結(jié)合的抑制Fig·3一 5AnalysisoftheinflueneeofsTLR一 2tothebindingofMBLtoLPSstimulated THPllCD14byCell一ELISA200口如100.師7石.如50日如2石口如10日如圖3七LPS增強(qiáng)THHICD14細(xì)胞 TLR-2TLR礴mRNA的表達(dá)Fig.3一 LPSenhaneedtheexp鄺 ssionofTLR一 2andTLR-4mRNAonTHPllCD14hyRT-PCR- M:DNAmarker:l一3:TLR一2mRNA’.l:no一 LPS:2:LPSZh:3:LPS24h:4場:TLR一4m朋A.4:non一 Lps;5:LpsZh:6:Lps24h;7:9:p一 actinmRNA·7:non一 Lps:8:LpsZh:9:Lps24h 3.2.4MBL抑制LPS刺激的THPI/CD14細(xì)胞Nr一比的轉(zhuǎn)位 westemboh結(jié)果顯示,在轉(zhuǎn)移了核蛋白的PvD膜上,細(xì)胞對(duì)照組僅能見到極淺的目的蛋白條帶,LPS刺激組(培養(yǎng)液中加入100林g/L的LPS,培養(yǎng) 60min)蛋白條帶明顯增粗,MBL組(培養(yǎng)液中加入100林g/L的LPs與10m叭MBL,培養(yǎng) 60min)蛋白條帶有所減弱(圖3一7)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人MBL-CLR表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 蔡學(xué)敏,左大明,趙娜,張麗蕓,陳政良. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2007(01)
[2]MBL對(duì)LPS誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟的調(diào)節(jié)作用[J]. 陳月,余新沛,劉瑩,陳政良. 免疫學(xué)雜志. 2006(04)
[3]MBL對(duì)LPS刺激的不同分化和活化狀態(tài)THP1/CD14細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α和IL-12的影響[J]. 陳月,余新沛,盧曉,陳政良. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2006(05)
[4]MBL對(duì)樹突狀細(xì)胞體外分化成熟的影響[J]. 陳月,陳政良,左大明,裘毅剛,張麗蕓. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2005(02)
[5]人血漿中MBL-MASP復(fù)合物的純化與分離[J]. 陳月,張麗蕓,陳政良. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(12)
[6]哺乳類C型凝集素超級(jí)家族[J]. 陳政良. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1997(06)
[7]甘露聚糖結(jié)合蛋白基因突變引起的免疫缺陷[J]. 陳政良. 生命的化學(xué)(中國生物化學(xué)會(huì)通訊). 1997(04)
[8]甘露聚糖結(jié)合蛋白[J]. 陳政良. 國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊). 1997(01)
本文編號(hào):2938546
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/shiyanyixue/2938546.html
最近更新
教材專著