miRNA是生物體內(nèi)一類長(zhǎng)度約為22個(gè)核苷酸的非編碼小RNA。在miRNA加工成熟的過程中,大多數(shù)情況下,miRNA雙鏈中只有一條鏈會(huì)保留下來,參與形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體（RISC）。有時(shí)niRNA雙鏈的兩條鏈會(huì)被同時(shí)保留下來發(fā)揮生物學(xué)功能,一條成熟體稱作miRNA,另一條被稱作miRNA-star。成熟的miRNA與靶基因3’UTR區(qū)形成不完全的配對(duì)抑制翻譯過程,或形成接近完全的配對(duì)導(dǎo)致靶基因mRNA降解。一個(gè)miRNA可能調(diào)控多個(gè)基因的表達(dá),一個(gè)基因也可能受幾個(gè)miRNA的調(diào)控,因此miRNA的調(diào)控形成的網(wǎng)絡(luò)具有復(fù)雜性和廣泛性。心臟作為脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育的過程中第一個(gè)形成并發(fā)揮功能的器官,其發(fā)育的每個(gè)階段都受到重要基因和信號(hào)通路的調(diào)控。目前已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iRNA對(duì)于心肌細(xì)胞的增殖、遷移、分化以及心臟的發(fā)育成熟等生理活動(dòng)具有重要影響。多個(gè)研究證實(shí),miRNA在先天性心臟病、心肌肥厚及心力衰竭等成年型心臟病病理過程中發(fā)揮著重要的作用。在本課題組前期實(shí)驗(yàn)中,使用Affymetrix GeneChip miRNA Array芯片對(duì)收集的法洛氏四聯(lián)癥及正常人心肌組織進(jìn)行miRNA篩選,... 

【文章來源】：復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?ｍｉＲ－２２２在斑馬魚不同發(fā)育時(shí)期及成魚不同器官中表達(dá)情況檢測(cè)

在斑馬魚中的上調(diào)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，注射２５０ｐｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２組斑馬魚??ｍｉＲ－２２２表達(dá)比對(duì)照組上調(diào)３倍；注射５０雌ｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２組斑馬魚ｍ化－２２２表??達(dá)比對(duì)照組上調(diào)５倍（圖２－Ａ？Ｂ）??Ａ??．／／?．／?／??ｍｉＲ－２２２??Ｂ?７?１?＊??６?．??Ｖ??Ｉ?５．?１—＾??呂??ｓ?４?■?。，??？?＊?＃?－．Ｖ：－??＾?３?．???ＢＲＣ．??＞?□ｐｒｃ－ｎｉｉＲ－２２２??請(qǐng)２?？??：■麵?Ｍ??Ｕ?Ｉ?■?■?，?■?ｎ－Ｔ￣ｒ—?，??。盧?與４??圖２：?Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２可顯著上調(diào)斑馬魚體內(nèi)加Ｒ－２２２的表達(dá)。（Ａ）；半定量??ＲＴ－ＰＣ民檢測(cè)注射２５０ｐｇ和５００ｐｇ?ｐｒｃ－ｎｉｉ艮－２２２組斑馬魚ｍｉＲ－２２２表達(dá)情況。（Ｂ）：??實(shí)時(shí)癸光定量ＰＣＲ檢測(cè)注射２５０ｐｇ和５０雌ｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２組斑馬魚ｍｉＲ－２２２表達(dá)??情況。＊代表Ｐ＜〇，〇５，＊＊代表ＰＯ．Ｏｌ。??２７??

上調(diào)組在解剖學(xué)顯微鏡下未觀察異常表型。但是從２４?ｈｐｆ左右，斑馬魚胚胎的整??體形態(tài)出現(xiàn)也臟孺動(dòng)速度緩慢，發(fā)育較遲緩的現(xiàn)象。??注射ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２后４８ｈｐｆ，?ｍｉＲ－２２２上調(diào)的斑馬魚也臟與對(duì)照組（圖３－ａ和??圖３－ｄ）相比，斑馬魚整體形態(tài)未有顯著差別（圖３－ｂ和圖３－Ｃ）。一部分斑馬魚??屯、臟搏動(dòng)無力，形態(tài)呈線狀（圖３－ｅ）。另一部分斑馬魚出現(xiàn)屯、房異常膨大，也包??水腫的現(xiàn)象（圖３－ｆ）。同時(shí)，ｍｉＲ－２２２上調(diào)組伴隨有卵黃囊較大，血流減緩，紅??細(xì)胞減少等現(xiàn)象，也率由正常的（１４２?＋?８）次／ｍｉｎ減少為（８０?＋?２巧次／ｍｉｎ。??：隣??Ｋ．Ｃ．?＊ｔｃ．??Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２?Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２??Ｐｒ＾ｍｍ－２２２?…??圖３；?ｍｉＲ－２２２表達(dá)上調(diào)后４８ｈｐｆ斑馬魚必臟表型異常。（ａ、ｄ）：對(duì)照組斑??馬魚。（ｂ、Ｃ、ｅ、ｆ）：?ｍｉＲ－２２２上調(diào)組斑馬魚。??２８??


本文編號(hào)：2938523