心肌祖細胞增殖和分化是心臟損傷后修復(fù)再生的基礎(chǔ),而Isl1被認為是心肌祖細胞的特異性標志。為了研究以及示蹤Isl1+心肌祖細胞及其分化后代,該文嘗試利用成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列CRISPR/Cas9系統(tǒng),將Cre ERT2定點插入到小鼠Isl1內(nèi)源基因啟動子之后,建立了Cre ERT2基因敲入小鼠模型。通過與Rosa26-lox P-neo-lox P-lac Z小鼠（Rosa26-lac Z+）交配,獲得Isl1-Cre ERT（KI）/Rosa26-lac Z+雙雜合小鼠。經(jīng)過基因型鑒定、組織表達譜測定和X-gal染色、冰凍切片和石蠟切片等方法,確認基因敲入小鼠的Cre ERT2表達在成年小鼠心臟竇房結(jié)、心臟神經(jīng)節(jié)、主動脈弓和肺動脈根部,與文獻報道的Isl1表達部位相同。該研究建立的模型可為研究心肌祖細胞的增殖和譜系示蹤提供重要的模型。 

【文章來源】：中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2015年10期

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1材料
    1.2方法
2結(jié)果
    2.1 F0代小鼠的獲得與繁育
    2.2 Isl1-Cre ERT（KI）/Rosa26-lac Z+雙雜合小鼠Cre ERT2和Isl1組織表達水平的檢測
    2.3 Isl1-Cre ERT2（KI）/Rosa26-lac Z雙陽性小鼠心臟組織Lac Z染色的組織學(xué)鑒定
3討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]CRISPR-Cas9技術(shù)在干細胞中的應(yīng)用[J]. 梁丹,吳宇軒,李勁松.  生命科學(xué). 2015(01)
[2]有氧運動誘導(dǎo)心肌肥大和心肌細胞增殖的研究進展[J]. 周云鶴.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2013(10)
[3]基因譜系示蹤技術(shù)揭示小鼠Tbx18+心臟祖細胞向心系細胞分化的潛能[J]. 杜建霖,張進,蒲荻,高二志,楊景濤,高凌志,夏爽,鄧松柏,佘強.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2011(02)



本文編號：2928676