目的利用Affymetric Human gene1.0基因表達(dá)譜芯片對(duì)COX-2選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞在炎性狀態(tài)下PGE2合成相關(guān)基因表達(dá)譜的改變進(jìn)行研究,為塞來(lái)昔布的作用機(jī)制提供基因?qū)W數(shù)據(jù),并驗(yàn)證基因表達(dá)譜芯片篩選COX-2及PGE2相關(guān)基因表達(dá)差異的可靠性。方法收集3例關(guān)節(jié)軟骨組織標(biāo)本,其中2例來(lái)源于全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)、1例來(lái)源于正常關(guān)節(jié)軟骨,分離培養(yǎng)軟骨細(xì)胞。將每株細(xì)胞分為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（IL.1β刺激）、藥物干預(yù)組（塞來(lái)昔布+IL-1β刺激）。低溫保存后提取總RNA,分別標(biāo)記熒光探針后與Affymeitric Human gene1.0基因表達(dá)譜芯片雜交。雜交后進(jìn)行圖像掃描和數(shù)據(jù)分析,分別比較陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組、藥物干預(yù)組與陽(yáng)性對(duì)照組,篩查出軟骨細(xì)胞中與COX-2及PGE2代謝相關(guān)的差異表達(dá)基因,并使用Real-time PCR及ELISA技術(shù)對(duì)COX-2及PGE2相關(guān)基因篩查結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果第一部分：芯片篩查結(jié)果1)3株細(xì)胞的陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組篩選出共同差異表達(dá)基因212條,這些基因涉及細(xì)胞外基質(zhì)合成與降解基因、免疫與炎癥反應(yīng)基因、細(xì)胞增殖與凋亡基... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：103 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分：基因表達(dá)譜芯片篩查炎癥狀態(tài)下塞來(lái)昔布對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞PGE2相關(guān)基因表達(dá)譜的改變
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 塞來(lái)昔布對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞COX-1、COX-2、mPGE-1、mPGE-2、MMP1、MMP3、MMP13、EP2、EP4表達(dá)的影響
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
英文名詞及縮寫
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]特異性環(huán)氧合酶-2抑制劑西樂(lè)葆胃黏膜安全性實(shí)驗(yàn)研究[J]. 李軍婷,李兆申,湛先保,崔忠敏,聶時(shí)南.  中華消化雜志. 2002(01)



本文編號(hào)：2927036