目的:探討受體相互作用蛋白3（RIP3）在卡介苗（BCG）誘導小鼠巨噬細胞RAW264.7凋亡過程中的調(diào)控作用。方法:構(gòu)建RIP3腺病毒干擾載體并感染巨噬細胞,并用BCG進行感染。采用噻唑藍（MTT）比色法檢測細胞活力;利用流式細胞術(shù)對細胞凋亡率、線粒體膜電位及活性氧含量進行檢測;通過Western blot檢測RIP3及凋亡相關(guān)蛋白的表達水平。結(jié)果:BCG感染RAW264.7細胞后,細胞活力下降且RIP3蛋白表達量顯著上調(diào)（P<0.01）。而與BCG單獨感染組相比,BCG感染結(jié)合RIP3干擾處理組細胞凋亡率及活性氧含量降低,線粒體膜電位升高,同時促凋亡蛋白Bax與cleaved caspase-3的蛋白水平顯著升高,抑凋亡蛋白Bcl-2的表達量顯著降低（P<0.01）。結(jié)論:在BCG感染小鼠巨噬細胞RAW264.7的過程中,RIP3參與了BCG誘導的RAW264.7細胞的凋亡,且該過程可能是通過線粒體途徑實現(xiàn)的。 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2019年07期 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 細胞系與菌株
    2 主要材料和試劑
    3 方法
        3.1 細胞培養(yǎng)
        3.2 菌株培養(yǎng)
        3.3 實驗分組
        3.4 MTT法檢測細胞存活率
        3.5 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        3.6 RAW264.7細胞ROS水平的測定
        3.7 RAW264.7細胞線粒體膜電位的檢測
        3.8 Western blot 檢測蛋白表達
    4 統(tǒng)計學處理
結(jié) 果
    1 BCG感染對RAW264.7細胞活力的影響
    2 BCG感染 RAW264.7細胞后RIP3表達水平的變化及RIP3腺病毒干擾載體的驗證
    3 RIP3對 BCG感染后RAW264.7細胞凋亡率的影響
    4 RIP3對BCG感染后RAW264.7細胞活性氧水平的影響
    5 RIP3對BCG感染后RAW264.7細胞線粒體膜電位的影響
    6 RIP3對BCG感染后RAW264.7細胞凋亡相關(guān)分子蛋白水平的影響
討 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]小鼠巨噬細胞內(nèi)表達結(jié)核分枝桿菌CFP10-ESAT6融合蛋白對細胞增殖和凋亡的影響[J]. 任琳,李軼,王山梅,師娟,郭思.  中國病理生理雜志. 2013(10)
[2]凋亡與腫瘤及其治療進展[J]. 周彩虹,黃啟福.  中國病理生理雜志. 2004(11)

博士論文
[1]Wnt/β-catenin信號對巨噬細胞抗結(jié)核分枝桿菌感染的免疫調(diào)控機制研究[D]. 吳曉玲.寧夏大學 2014



本文編號：2925832