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E.coli Era及其相互作用蛋白的結(jié)構(gòu)與功能研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-16 12:00
  Era,即大腸桿菌Ras樣蛋白(E.coli Ras-like protein Era),基因命名為era。Era是在原核和真核生物以及植物中普遍存在的G蛋白,是一個(gè)結(jié)構(gòu)上既具有GTP結(jié)合結(jié)構(gòu)域又有RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域、不同于Ras的獨(dú)特的新的G蛋白亞家族。大腸桿菌Era為細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所必需并參與細(xì)菌分裂周期的調(diào)控。根據(jù)本課題組篩選Era結(jié)合蛋白時(shí)獲得的噬菌體中的插段包含大腸桿菌的yggG speB基因,本研究分析了Era與YggG SpeB的相互作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在細(xì)菌內(nèi)可能存在Era和SpeB的同源二聚體。YggG的過(guò)表達(dá)阻礙細(xì)菌生長(zhǎng),并使細(xì)菌逐漸趨向死亡。在熒光顯微鏡下細(xì)菌形態(tài)的變化,以及DAPI染色和透射電子顯微鏡觀察,YggG的表達(dá)與Era突變(使Era功能降低時(shí))對(duì)細(xì)菌分裂的影響有類似之處,即細(xì)菌DNA合成,子代DNA分離后;分裂停滯,形成細(xì)菌繁殖受阻時(shí),2-4倍體的出現(xiàn)。YggG敲除的菌株呈現(xiàn)綠色。生物信息學(xué)的分析提示:YggG可能是一種金屬蛋白酶,屬于Peptidase M48家族, 臼·罕醫(yī)夭念傅士行住公式含有HE-基序。The... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
英文縮寫(xiě)詞表
中文摘要
英文摘要
大腸桿菌Era的結(jié)構(gòu)與功能
    一、 Era的結(jié)構(gòu)和分布
    二、 Era的功能
    三、 Era研究的意義
    四、 結(jié)束語(yǔ)
    參考文獻(xiàn)
實(shí)驗(yàn)一 大腸桿菌era speB yggG生物信息學(xué)分析
    一、 大腸桿菌era speB yggG的基本特征
    二、 大腸桿菌era speB yggG基因芯片表達(dá)差異的數(shù)據(jù)
    三、 大腸桿菌era speB yggG保守結(jié)構(gòu)域的分析
    四、 大腸桿菌yggG的同源序列
    五、 有關(guān)大腸桿菌speB yggG研究的文獻(xiàn)
    六、 討論
實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)pT25與pT18載體的構(gòu)建
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
實(shí)驗(yàn)三 Era SpeB YggG ZggG YggG2蛋白之間的相互作用
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
實(shí)驗(yàn)四 E.coli Era SpeB YggG在DH5αTAP106 DHM中的誘導(dǎo)表達(dá)及對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
實(shí)驗(yàn)五 E.coli era與yggG酵母雙雜交表達(dá)載體的構(gòu)建
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
實(shí)驗(yàn)六 大腸桿菌Era YggG溫度誘導(dǎo)型GFP即融合表達(dá)載體的構(gòu)建
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
實(shí)驗(yàn)七 大腸桿菌DY330 DY331 yggG基因敲除菌株的建立
    一、 實(shí)驗(yàn)材料
    二、 實(shí)驗(yàn)方法
    三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    四、 討論
全文總結(jié)與討論
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大腸桿菌中高表達(dá)重組Era可溶性蛋白的純化及其生化特性[J]. 陳蘇民,DonaldL.Court.  生物化學(xué)雜志. 1992(01)



本文編號(hào):2920106

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