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E.coli Era及其相互作用蛋白的結構與功能研究

發(fā)布時間:2020-12-16 12:00
  Era,即大腸桿菌Ras樣蛋白(E.coli Ras-like protein Era),基因命名為era。Era是在原核和真核生物以及植物中普遍存在的G蛋白,是一個結構上既具有GTP結合結構域又有RNA結合結構域、不同于Ras的獨特的新的G蛋白亞家族。大腸桿菌Era為細菌生長繁殖所必需并參與細菌分裂周期的調控。根據(jù)本課題組篩選Era結合蛋白時獲得的噬菌體中的插段包含大腸桿菌的yggG speB基因,本研究分析了Era與YggG SpeB的相互作用。實驗結果表明:在細菌內可能存在Era和SpeB的同源二聚體。YggG的過表達阻礙細菌生長,并使細菌逐漸趨向死亡。在熒光顯微鏡下細菌形態(tài)的變化,以及DAPI染色和透射電子顯微鏡觀察,YggG的表達與Era突變(使Era功能降低時)對細菌分裂的影響有類似之處,即細菌DNA合成,子代DNA分離后;分裂停滯,形成細菌繁殖受阻時,2-4倍體的出現(xiàn)。YggG敲除的菌株呈現(xiàn)綠色。生物信息學的分析提示:YggG可能是一種金屬蛋白酶,屬于Peptidase M48家族, 臼·罕醫(yī)夭念傅士行住公式含有HE-基序。The... 

【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
大腸桿菌Era的結構與功能
    一、 Era的結構和分布
    二、 Era的功能
    三、 Era研究的意義
    四、 結束語
    參考文獻
實驗一 大腸桿菌era speB yggG生物信息學分析
    一、 大腸桿菌era speB yggG的基本特征
    二、 大腸桿菌era speB yggG基因芯片表達差異的數(shù)據(jù)
    三、 大腸桿菌era speB yggG保守結構域的分析
    四、 大腸桿菌yggG的同源序列
    五、 有關大腸桿菌speB yggG研究的文獻
    六、 討論
實驗二 細菌雙雜交系統(tǒng)pT25與pT18載體的構建
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
實驗三 Era SpeB YggG ZggG YggG2蛋白之間的相互作用
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
實驗四 E.coli Era SpeB YggG在DH5αTAP106 DHM中的誘導表達及對細菌生長的影響
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
實驗五 E.coli era與yggG酵母雙雜交表達載體的構建
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
實驗六 大腸桿菌Era YggG溫度誘導型GFP即融合表達載體的構建
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
實驗七 大腸桿菌DY330 DY331 yggG基因敲除菌株的建立
    一、 實驗材料
    二、 實驗方法
    三、 實驗結果
    四、 討論
全文總結與討論
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]大腸桿菌中高表達重組Era可溶性蛋白的純化及其生化特性[J]. 陳蘇民,DonaldL.Court.  生物化學雜志. 1992(01)



本文編號:2920106

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