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新生小鼠卵巢移植片培育MⅡ卵制備胚胎干細(xì)胞

發(fā)布時間:2017-04-07 22:06

  本文關(guān)鍵詞:新生小鼠卵巢移植片培育MⅡ卵制備胚胎干細(xì)胞,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的: 1.1.建立從原始卵泡培育具有良好發(fā)育潛能的MⅡ卵的組織工程技術(shù)方案; 2.2.從原始卵泡培育MⅡ卵制備胚胎干細(xì)胞; 3.3.為人卵巢工程建立實驗基礎(chǔ)。 方法: 新生0.5d小鼠卵巢切片異體移植到成年母鼠腎被膜下,21天后對宿主腹腔注射PMSG10IU/只,給藥44h后用機(jī)械穿刺法收獲卵巢移植物中的卵冠丘復(fù)合體,再通過體外成熟培養(yǎng)16h,得到的IVM-MⅡ卵進(jìn)行體外受精,受精卵發(fā)育至囊胚時從內(nèi)細(xì)胞團(tuán)制備小鼠胚胎干細(xì)胞,并對建立的干細(xì)胞系進(jìn)行鑒定。 結(jié)果: 1.從移植切片卵巢所獲COCs在體外成熟后得到IVM-MⅡ卵,可受精并發(fā)育至囊胚分離出ICM,成功制備1批胚胎干細(xì)胞并傳至P4代,,并通過畸胎瘤、堿性磷酸酶染色、SSEA-1和嵌合體實驗對建立的胚胎干細(xì)胞完成鑒定。 結(jié)論: 本實驗報道證實了新生鼠卵巢(卵泡募集前卵巢)切片異體移植聯(lián)合體外成熟培養(yǎng)獲得的成熟卵(MⅡ卵)具有很好的發(fā)育潛能,可供制備胚胎干細(xì)胞。為人廢棄卵巢培育MⅡ卵并制備胚胎干細(xì)胞建立了實驗?zāi)P汀?br/> 【關(guān)鍵詞】:卵巢 卵母細(xì)胞 體外成熟 胚胎干細(xì)胞 嵌合體
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R737.31;R-332
【目錄】:
  • 英文縮略詞表5-6
  • 中文摘要6-7
  • Abstract7-9
  • 前言9-13
  • 實驗材料與方法13-27
  • 一、 實驗動物13-27
  • 實驗方法27-48
  • 實驗結(jié)果48-60
  • 討論60-64
  • 結(jié)論64-65
  • 參考文獻(xiàn)65-71
  • 致謝71-72
  • 綜述72-79
  • 參考文獻(xiàn)77-79

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6 印惠s

本文編號:291406


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