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攜載增強型綠色熒光蛋白基因慢病毒標記小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞示蹤方法

發(fā)布時間:2020-12-12 23:09
  目的探討慢病毒載體介導(dǎo)增強型綠色熒光蛋白(enhanced green fluorecent protein,eGFP)轉(zhuǎn)染小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)的最佳感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI)。方法通過組織貼壁法得到mUCMSCs;用生長增殖曲線、成骨、成軟骨及成脂分化進行鑒定;以MOI為50、100、150、200攜載eGFP的慢病毒載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染mUCMSC,倒置顯微鏡下觀察熒光表達,確定熒光表達率最高的MOI組。結(jié)果 eGFP慢病毒以MOI=150轉(zhuǎn)染mUCMSC,效率較高,可直接用于體內(nèi)示蹤。結(jié)論用小鼠臍帶可以分離出mUCMSCs,MOI=150時攜載eGFP的慢病毒傳染mUCMSCs效果最好。 

【文章來源】:延安大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2019年03期

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 mUCMSCs的分離培養(yǎng)
    1.3 mUCMSCs增殖曲線繪制
    1.4 mUCMSCs分化潛能檢測
    1.5 mUCMSCs的標記
2 結(jié)果
    2.1 mUCMSCs的分離及培養(yǎng)
    2.2 mUCMSCs增殖曲線
    2.3 mUCMSC的成軟骨、成脂、成骨三向分化
    2.4 慢病毒載體介導(dǎo)GFP基因轉(zhuǎn)染mUCMSCs的MOI篩選
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞的體外誘導(dǎo)分化[J]. 朱慧,葉莉,何潔,余璞,王金祥,王強,趙晶,龐榮清,白杰英.  中國實驗動物學(xué)報. 2015(06)



本文編號:2913437

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