慢性粒細胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一種起源于異常多能造血干細胞的克隆增殖性疾病,bcr/abl融合基因的持續(xù)表達在該病的形成過程中起重要作用。目前,國內(nèi)對CML發(fā)病機制和治療的研究主要選用含有bcr/abl融合基因的體外細胞模型、bcr/abl轉(zhuǎn)化的造血細胞株在小鼠體內(nèi)的定殖模型或K562細胞移植裸鼠成皮下瘤后,再接種到免疫缺陷小鼠建立CML模型鼠的方法[1]。而利用逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的小鼠骨髓轉(zhuǎn)導(dǎo)、移植模型研究人類CML的發(fā)生、發(fā)展及其生物學(xué)特性,是20世紀90年代以來國外該領(lǐng)域研究的新進展[2],國內(nèi)尚未見相關(guān)報道。本課題以bcr/ab逆轉(zhuǎn)錄病毒Mig210為載體,經(jīng)包裝細胞包裝后收集病毒上清并測定滴度,感染經(jīng)5-FU預(yù)處理的Balb/c雄性小鼠骨髓細胞,再回輸?shù)浇?jīng)致死劑量γ射線照射后的同種雌性受體鼠中,首次成功建立了CML小鼠移植模型。并在此基礎(chǔ)上又建立了再次移植模型。其主要方法、結(jié)果及結(jié)論如下:1.bcr/ab逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的慢性粒細胞白血病樣小鼠模型的首次建立含bcr/abl癌基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒Mig210載體經(jīng)Phoenix-Ampo細... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒酶切產(chǎn)物電泳圖

圖1-3 5-FU處理后骨髓中原始細胞占有核細胞比ig1-3 Archaeocyte of BM cell compare; with nucleated cell after 5-FU treat病毒上清感染骨髓細胞的影響感染24h、48天后均可觀察到未使用FN組的骨髓細胞漂浮于整個FN組的活細胞附著于瓶底,細胞狀態(tài)較好,臺盼藍染色顯示使用的活細胞多20%～30%（附圖1-5）。小鼠存活狀態(tài)觀察線照射的受體小鼠次日出現(xiàn)畏冷、恐慌、相擁縮成一團，1 周之逐漸消瘦、活動力明顯減低，這些癥狀在 2 周后逐漸改善。A 時皮膚開始出現(xiàn)出血點，第四個月后相繼死去。解剖發(fā)現(xiàn)肝、其他組小鼠中途未見死亡。所有經(jīng) γ 射線照射的受體小鼠，2~3

2 7 . 3 7 ± 3 . 4 4 8 6 . 0 7 ± 4 . 6 7 1 3 . 9 3 ± 4 . 6 7 1 織病理檢查周時脾臟開始增大，晚期有大量白血病細胞、C、D組的肝脾在前4周內(nèi)無差異，由于正常組的脾縮小約0.02g；B,C,D組肝組織附圖1-11）。A組小鼠在移植12周后相繼發(fā)移植小鼠的bcr/abl融合基因CR檢測A組受體鼠骨髓細胞和脾細胞時肝組織有bcr/abl融合基因，DNA測序證全符合，其它組小鼠未檢測出bcr/abl融合


本文編號：2898499