結(jié)節(jié)病肉芽腫C57BL/6小鼠模型Th17/Treg免疫平衡紊亂的研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 01:34
目的利用結(jié)核分枝桿菌超氧化物歧化酶(superoxidaseA,SodA)多肽建立結(jié)節(jié)病肉芽腫C57BL/6小鼠模型。研究結(jié)節(jié)病肉芽腫小鼠模型肺組織內(nèi)Treg/Th17細(xì)胞分化的改變及一些相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化,分析Treg/Th17細(xì)胞分化與相關(guān)細(xì)胞因子水平變化的關(guān)系,進(jìn)一步探索結(jié)節(jié)病發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制。方法一.結(jié)節(jié)病肉芽腫C57BL/6小鼠模型的制備及鑒定21只雌性C57BL/6小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組:第1天:實(shí)驗(yàn)組A組:皮下注射SodA50μg與不完全弗氏佐劑(IFA)0.25ml,B組:皮下注射IFA0.25ml+PBS0.25ml;C組:皮下注射PBS0.5ml。第14天:A組:SodA與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)于0.5mlPBS(SodA50μg+瓊脂糖珠6000粒)中,尾靜脈注射;B組:瓊脂糖珠6000粒(溶于0.5mlPBS)尾靜脈注射;C組:PBS0.5ml尾靜脈注射;第22天小鼠麻醉脫頸椎處死。觀察小鼠肺部及外周淋巴結(jié)大體變化;HE染色觀察肺組織、淋巴結(jié)病理組織學(xué)變化,觀察有無(wú)結(jié)節(jié)病樣肉芽腫形成;肉芽腫陽(yáng)性的切片行免疫組化染色檢測(cè)巨噬細(xì)胞特異性抗原Mac-2及淋巴細(xì)胞...
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:94 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
結(jié)節(jié)病免疫學(xué)機(jī)制的假設(shè)模型
結(jié)節(jié)病肉芽腫 C57BL/6 小鼠模型 Th17/Treg 免疫平衡紊亂-17A在其中作用最為重要。IL-17與其受體結(jié)合,激活促炎細(xì)胞因子和趨泌,趨化中性粒細(xì)胞、T效應(yīng)細(xì)胞等聚集,增強(qiáng)各種免疫應(yīng)答。目前已證身免疫疾病患者和動(dòng)物模型中都發(fā)現(xiàn)RORγt、IL-17表達(dá)水平上升[14]。
后 1000r/min 離心 5min,去除上清。 500μl 反應(yīng)液振蕩混勻后待上機(jī)分析。owcytomix Pro 分析軟件,根據(jù)熒光強(qiáng)度得出細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)學(xué)處理料以 x ±s表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),多方差分析(F檢驗(yàn)),組間比較采用SNK檢驗(yàn),以P<0.05表示差體觀察剖后可見(jiàn)頸部、腋下、腹股溝淋巴結(jié)及肺門(mén)淋巴結(jié)多發(fā)腫大巴結(jié)長(zhǎng)徑在 2-6mm,見(jiàn)圖 1-1、2、4、6。肺部肉眼觀察未見(jiàn)
本文編號(hào):2896799
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:94 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
結(jié)節(jié)病免疫學(xué)機(jī)制的假設(shè)模型
結(jié)節(jié)病肉芽腫 C57BL/6 小鼠模型 Th17/Treg 免疫平衡紊亂-17A在其中作用最為重要。IL-17與其受體結(jié)合,激活促炎細(xì)胞因子和趨泌,趨化中性粒細(xì)胞、T效應(yīng)細(xì)胞等聚集,增強(qiáng)各種免疫應(yīng)答。目前已證身免疫疾病患者和動(dòng)物模型中都發(fā)現(xiàn)RORγt、IL-17表達(dá)水平上升[14]。
后 1000r/min 離心 5min,去除上清。 500μl 反應(yīng)液振蕩混勻后待上機(jī)分析。owcytomix Pro 分析軟件,根據(jù)熒光強(qiáng)度得出細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)學(xué)處理料以 x ±s表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),多方差分析(F檢驗(yàn)),組間比較采用SNK檢驗(yàn),以P<0.05表示差體觀察剖后可見(jiàn)頸部、腋下、腹股溝淋巴結(jié)及肺門(mén)淋巴結(jié)多發(fā)腫大巴結(jié)長(zhǎng)徑在 2-6mm,見(jiàn)圖 1-1、2、4、6。肺部肉眼觀察未見(jiàn)
本文編號(hào):2896799
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