建立新的高效液相色譜法(HPLC),檢測佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠血清中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)。SD大鼠成模后取血清,用蛋白沉淀法處理,離心后取上清液進(jìn)樣�？疾煸摲椒ǖ膶傩浴�(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、回收率和穩(wěn)定性等能否用于AA大鼠Trp和Kyn含量測定。Trp保留時間9.0 min,線性范圍25～1 000μmol/L,檢測限0.27μmol/L;Kyn保留時間5.6 min,線性范圍0.5～10μmol/L,檢測限0.07μmol/L;平均回收率在80%～120%范圍之內(nèi);日內(nèi)、日間精密度RSD均小于15%,符合生物樣品定量分析方法要求,并可應(yīng)用于AA大鼠血清中Trp和Kyn測定。建立了一種靈敏度高、快速的HPLC分析方法,適于測定AA大鼠血清中Trp和Kyn含量。
【部分圖文】：

測波長:280nm;Kyn紫外檢測波長:360nm;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:20μl。1．7統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)分析應(yīng)用SPSS16.0軟件處理，數(shù)據(jù)以x珋±s表示，兩組數(shù)據(jù)之間比較采用t檢驗，多組之間采用單因素方差分析(ANOVA)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2．1AA大鼠模型的建立模型組大鼠在免疫后第14天出現(xiàn)繼發(fā)病變，出現(xiàn)足爪紅腫，體質(zhì)量減輕，全身評分、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)和足爪腫脹度明顯增加，與正常組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見圖1～6。圖1肉眼觀察大鼠足爪腫脹A:對照組;B:模型組2．2HPLC方法學(xué)結(jié)果2．2．1專屬性實驗在1.6項色譜條件下分別對空白血清、空白血清加對照品溶液、供試品溶液進(jìn)樣分析，Trp保留時間9.0min，Kyn保留時間5.6min，峰形良好，樣品中其他內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測定，與雜質(zhì)分離良好。結(jié)果見圖7～9。圖2大鼠全身評分與正常比較:＊＊P＜0.01圖3大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)與正常比較:＊＊P＜0.01圖4大鼠關(guān)節(jié)腫脹數(shù)與正常比較:＊＊P＜0.01·4131·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2019Aug;54(8)

天出現(xiàn)繼發(fā)病變，出現(xiàn)足爪紅腫，體質(zhì)量減輕，全身評分、關(guān)節(jié)炎指數(shù)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)和足爪腫脹度明顯增加，與正常組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。見圖1～6。圖1肉眼觀察大鼠足爪腫脹A:對照組;B:模型組2．2HPLC方法學(xué)結(jié)果2．2．1專屬性實驗在1.6項色譜條件下分別對空白血清、空白血清加對照品溶液、供試品溶液進(jìn)樣分析，Trp保留時間9.0min，Kyn保留時間5.6min，峰形良好，樣品中其他內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測定，與雜質(zhì)分離良好。結(jié)果見圖7～9。圖2大鼠全身評分與正常比較:＊＊P＜0.01圖3大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)與正常比較:＊＊P＜0.01圖4大鼠關(guān)節(jié)腫脹數(shù)與正常比較:＊＊P＜0.01·4131·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2019Aug;54(8)

大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)
【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2891520