目的研究線粒體融合蛋白2(Mfn2)在姜黃素減輕膿毒癥小鼠淋巴細(xì)胞凋亡中的作用。方法將清潔級(jí)雄性Balb/c小鼠165只隨機(jī)分為假手術(shù)組、膿毒癥組、姜黃素干預(yù)組、姜黃素對(duì)照組、陰性病毒膿毒癥組、陰性病毒姜黃素干預(yù)組、Mfn2干擾膿毒癥組、Mfn2干擾姜黃素干預(yù)組,每組15只;剩余小鼠隨機(jī)分為正常組、陰性病毒組、Mfn2干擾組,用于檢測(cè)病毒轉(zhuǎn)染效率,每組15只。膿毒癥組及姜黃素干預(yù)組通過盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)建立膿毒癥小鼠模型,姜黃素干預(yù)組及姜黃素對(duì)照組予姜黃素200mg/(kg·d)灌胃1周,干擾組通過尾靜脈注射攜帶相應(yīng)干擾序列腺相關(guān)病毒建立模型,各組均于24h后處死小鼠,無菌留取脾臟,提取淋巴細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞凋亡情況以及線粒體膜電位,Western blot檢測(cè)淋巴細(xì)胞Mfn2、Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)水平。結(jié)果與假手術(shù)相比,膿毒癥組小鼠淋巴細(xì)胞Mfn2表達(dá)、Bcl-2/Bax明顯降低(均P0.05),膿毒癥組小鼠淋巴細(xì)胞凋亡率、Caspase-3表達(dá)、線粒體膜電位降低率明顯升高(均P0.05)。姜黃素預(yù)處理后,與膿毒癥組相比,Mfn2、Bcl-2/Bax表達(dá)均明顯升高(均P0.05),淋巴細(xì)胞凋亡率、Caspase-3表達(dá)、線粒體膜電位降低率均明顯降低(均P0.05)。下調(diào)Mfn2后,與膿毒癥組相比,姜黃素干預(yù)組凋亡率及Caspase-3、Bcl-2/Bax表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P0.05)。結(jié)論姜黃素抑制膿毒癥小鼠的淋巴細(xì)胞凋亡,其作用依賴于Mfn2的表達(dá)。
【部分圖文】：

黃素對(duì)照組與假手術(shù)組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（圖3）。2.3姜黃素干預(yù)對(duì)膿毒癥T淋巴細(xì)胞線粒體膜電位的影響經(jīng)CLP造模后，脾臟淋巴細(xì)胞從原先的紅光多聚體慢慢釋放為綠光單體，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而姜黃素干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，JC-1重新轉(zhuǎn)化為紅光多聚體，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明姜黃素干預(yù)后，造模后小鼠脾臟淋巴細(xì)胞凋亡明顯減少（圖4，插頁）。2.4姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠T淋巴細(xì)胞Mfn2表達(dá)的影響膿毒癥組小鼠在造模24h后取脾臟T淋巴細(xì)胞，Mfn2表達(dá)（0.473±0.579）較假手術(shù)組（2.576±1.139）明顯圖23組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞Mfn2表達(dá)水平的比較（與正常組比較，*P＜0.05；與陰性對(duì)照組比較，△P＜0.05）Ｍfn2β-actin正常組陰性對(duì)照組Mfn2干擾組正常組陰性對(duì)照組Mfn2干擾組*△脾臟淋巴細(xì)胞Mfn2蛋白的表達(dá)水平0.80.60.40.20.0·1923·

浙江醫(yī)學(xué)2019年第41卷第18期圖5各組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)水平（與假手術(shù)組比較，*P＜0.05；與膿毒癥組比較，**P＜0.05）脾臟淋巴細(xì)胞凋亡率（%）6040200*△假手術(shù)組膿毒癥組姜黃素干預(yù)組姜黃素對(duì)照組圖3流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV/PI雙染法檢測(cè)淋巴細(xì)胞凋亡（采取右上象限以及右下象限之和來比較各組間的凋亡差異；與假手術(shù)組比較，*P＜0.05；與膿毒癥組比較，△P＜0.05）降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；姜黃素干預(yù)后，膿毒癥組小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)（2.489±0.874）較膿毒癥組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而姜黃素對(duì)照組（2.034±1.337）小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)與假手術(shù)組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）（圖5）。2.5下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥中淋巴細(xì)胞凋亡作用的影響陰性病毒姜黃素組（25.347±4.099）與陰性病毒膿毒癥組（45.507±4.527）比較仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。而Mfn2干擾姜黃素組（33.010±3.721）較Mfn2干擾膿毒癥組（27.490±1.595）高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與陰性病毒膿毒癥組比較，Mfn2干擾膿毒癥組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（圖6），說明下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠淋巴細(xì)胞凋亡作用的影響降低或者消失。陰性病毒姜黃素組線粒體膜電位降低率較陰性病毒膿毒癥組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而Mfn2干擾姜黃素組線粒體膜電位較Mfn2干擾膿毒癥組稍有降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖7，插頁）。2.6下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠Caspase-3、Bcl-2/Bax表達(dá)的影響與假手術(shù)組Caspase-3（0.615±0.146）相比，膿毒癥組（1.935±0.145）小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），姜黃素干預(yù)

浙江醫(yī)學(xué)2019年第41卷第18期圖5各組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)水平（與假手術(shù)組比較，*P＜0.05；與膿毒癥組比較，**P＜0.05）脾臟淋巴細(xì)胞凋亡率（%）6040200*△假手術(shù)組膿毒癥組姜黃素干預(yù)組姜黃素對(duì)照組圖3流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV/PI雙染法檢測(cè)淋巴細(xì)胞凋亡（采取右上象限以及右下象限之和來比較各組間的凋亡差異；與假手術(shù)組比較，*P＜0.05；與膿毒癥組比較，△P＜0.05）降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；姜黃素干預(yù)后，膿毒癥組小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)（2.489±0.874）較膿毒癥組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而姜黃素對(duì)照組（2.034±1.337）小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的Mfn2表達(dá)與假手術(shù)組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）（圖5）。2.5下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥中淋巴細(xì)胞凋亡作用的影響陰性病毒姜黃素組（25.347±4.099）與陰性病毒膿毒癥組（45.507±4.527）比較仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。而Mfn2干擾姜黃素組（33.010±3.721）較Mfn2干擾膿毒癥組（27.490±1.595）高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與陰性病毒膿毒癥組比較，Mfn2干擾膿毒癥組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（圖6），說明下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠淋巴細(xì)胞凋亡作用的影響降低或者消失。陰性病毒姜黃素組線粒體膜電位降低率較陰性病毒膿毒癥組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而Mfn2干擾姜黃素組線粒體膜電位較Mfn2干擾膿毒癥組稍有降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖7，插頁）。2.6下調(diào)Mfn2后，姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠Caspase-3、Bcl-2/Bax表達(dá)的影響與假手術(shù)組Caspase-3（0.615±0.146）相比，膿毒癥組（1.935±0.145）小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），姜黃素干預(yù)
【參考文獻(xiàn)】

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2 姜云龍;趙光舉;應(yīng)嵐;洪廣亮;吳斌;邱俏檬;李萌芳;盧中秋;;姜黃素對(duì)膿毒癥小鼠淋巴細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制研究[J];中華急診醫(yī)學(xué)雜志;2014年07期

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2886724