TGF-β2對SD大鼠髁突軟骨細胞表型維持作用的研究
本文關鍵詞:TGF-β2對SD大鼠髁突軟骨細胞表型維持作用的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:[目的]觀察單層培養(yǎng)的大鼠髁突軟骨細胞連續(xù)傳代中表型的變化,研究TGF-β2作用后Ⅱ型膠原、聚集蛋白多糖表達的變化,對細胞表型的維持作用。探討TGF-β2對于去分化軟骨細胞的活化作用,為髁突生長發(fā)育及軟骨細胞源性組織工程研究提供依據(jù)。 [方法]選用新生SD大鼠的髁突軟骨作為原代培養(yǎng)的組織來源,建立髁突軟骨細胞有限細胞系。髁突軟骨細胞連續(xù)傳代培養(yǎng),通過觀察細胞形態(tài),Ⅱ型膠原的免疫組化染色,實時熒光定量PCR(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-PCR)方法檢測軟骨細胞外基質(zhì)中Ⅱ型膠原和聚集蛋白多糖mRNA的表達,觀察單層培養(yǎng)的大鼠髁突軟骨細胞連續(xù)傳代細胞表型的變化;在相同培養(yǎng)條件下,加入80ng/ml TGF-β2,以相同方法研究TGF-β2對髁突軟骨細胞表型的維持和對于去分化軟骨細胞的活化作用。 [結(jié)果]髁突軟骨細胞表型隨著細胞傳代逐漸降低,軟骨細胞逐漸由多角形變?yōu)殚L梭形,至第五代時軟骨細胞表型基本完全喪失。第三至五代加入80ng/ml TGF-β2組體外培養(yǎng)的髁突軟骨細胞Ⅱ型膠原及聚集蛋白多糖的表達較對照組增強。TGF-β2對于一、二代細胞Ⅱ型膠原及聚集蛋白多糖的表達增強不明顯。對于第三代開始去分化的軟骨細胞,TGF-β2有較強的活化作用。 [結(jié)論]髁突軟骨在連續(xù)傳代培養(yǎng)中,細胞表型逐漸喪失;傳代至第三代時細胞表型開始喪失,至第五代時細胞表型基本完全喪失。一定濃度的TGF-β2對髁突軟骨細胞的Ⅱ型膠原和聚集蛋白多糖合成具有維持作用,特別是對三、四、五代軟骨細胞作用明顯;同時對開始去分化的髁突軟骨細胞TGF-β2也有一定的活化作用,但活化作用相對有限。
【關鍵詞】:髁突軟骨細胞 細胞表型 TGF-β2
【學位授予單位】:昆明醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R329.2
【目錄】:
- 英文縮寫詞表5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-9
- 引言9-11
- 第一部分 髁突軟骨細胞的建立及TGF-β2對髁突軟骨細胞表型維持作用11-25
- 1. 材料11
- 2. 方法11-15
- 3. 結(jié)果15-21
- 4. 討論21-24
- 5. 結(jié)論24-25
- 第二部分 TGF-β2對于去分化髁突軟骨細胞的活化作用25-35
- 1. 材料25
- 2. 方法25-29
- 3. 結(jié)果29-33
- 4. 討論33-34
- 5. 結(jié)論34-35
- 全文總結(jié)35-36
- 參考文獻36-40
- 綜述40-48
- 參考文獻44-48
- 發(fā)表文章48-49
- 致謝49
【參考文獻】
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本文關鍵詞:TGF-β2對SD大鼠髁突軟骨細胞表型維持作用的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:287905
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