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不同尿酸濃度對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成神經(jīng)分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-04-02 21:05

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【摘要】:目的:觀察不同尿酸濃度對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)成神經(jīng)分化的影響。 方法:取健康成人的骨髓血,體外分離、純化、培養(yǎng)hBMSCs,用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),擴(kuò)增3代的hBMSCs為研究對(duì)象,分為完全培養(yǎng)基組(完全培養(yǎng)基)、對(duì)照組(Ommol/L尿酸)和干預(yù)誘導(dǎo)組(0.2、0.4、0.8mmol/L尿酸),先用含不同濃度(0、0.2、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神經(jīng)預(yù)誘導(dǎo)液誘導(dǎo)24小時(shí),再用含不同濃度(0、0.2、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神經(jīng)誘導(dǎo)液誘導(dǎo),完全培養(yǎng)基組始終用完全培養(yǎng)基。1小時(shí)后行尼氏體染色,2小時(shí)后用免疫組織化學(xué)法檢測細(xì)胞內(nèi)巢蛋白(Nestin)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、中分子量神經(jīng)絲蛋白(neurofilament protein medium, NF-M)的表達(dá)。 結(jié)果:hBMSCs經(jīng)誘導(dǎo)后,完全培養(yǎng)基組細(xì)胞始終呈長梭形,旋渦狀排列,尼氏體染色陰性。對(duì)照組及干預(yù)誘導(dǎo)組細(xì)胞的胞體逐漸收縮,突起并與相鄰細(xì)胞連成網(wǎng)狀,尼氏體染色陽性,含不同濃度尿酸的誘導(dǎo)組NSE、NF-M陽性率均較對(duì)照組明顯升高(P0.05),而且隨著尿酸濃度增加,其陽性表達(dá)率均逐漸增加(P0.05)。含不同濃度尿酸的誘導(dǎo)組Nestin陽性表達(dá)率較對(duì)照組明顯降低(P0.05),而且隨著尿酸濃度增加,其陽性表達(dá)率逐漸降低(P0.05)。誘導(dǎo)4h后,可見細(xì)胞明顯脫落。 結(jié)論:在一定條件下,尿酸能夠促進(jìn)hBMSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞的分化,并且具有一定的濃度依賴性。
【關(guān)鍵詞】:人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞分化 神經(jīng)元 尿酸
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R329.2
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-5
  • 引言5-6
  • 第—章 材料與方法6-11
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)試劑6
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與耗材6-7
  • 1.3 液體配制7-8
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)步驟8-11
  • 第二章 統(tǒng)計(jì)分析11-12
  • 第三章 結(jié)果12-19
  • 3.1 hBMSCs培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)變化12
  • 3.2 hBMSCs向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的形態(tài)學(xué)觀察12-13
  • 3.3 尼氏體染色13-14
  • 3.4 免疫組織化學(xué)檢測細(xì)胞內(nèi)NSE表達(dá)結(jié)果14-15
  • 3.5 免疫組織化學(xué)檢測細(xì)胞內(nèi)Nestin表達(dá)結(jié)果15-16
  • 3.6 免疫組織化學(xué)檢測細(xì)胞內(nèi)NF-M表達(dá)結(jié)果16-19
  • 第四章 討論19-21
  • 結(jié)論21-22
  • 參考文獻(xiàn)22-25
  • 綜述25-36
  • 綜述參考文獻(xiàn)32-36
  • 攻讀學(xué)位期間的研究工作36-37
  • 致謝37-38

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周燕;陳奎生;高劍波;韓瑞;魯晶晶;彭濤;賈延R

本文編號(hào):283137


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