【摘要】：人β-防御素-1(hBD-1)是一重要的抗菌肽分子,廣泛表達(dá)于分泌腺和皮膚粘摸的上皮細(xì)胞中,具有重要的抗感染功能。長(zhǎng)期以來(lái)hBD-1被認(rèn)為固有表達(dá)于各種組織,不被脂多糖(LPS)等所誘導(dǎo)。然而近來(lái)越來(lái)越多的研究表明hBD-1mRNA的表達(dá)水平可以被某些微生物及炎性介質(zhì)上調(diào)。我們實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)卡介苗胞壁蛋白組分能夠刺激人肺腺上皮細(xì)胞SPC-A-1中hBD-1 mRNA的表達(dá)增強(qiáng)四倍左右。hBD-1基因已被克隆,有兩個(gè)較小的外顯子中間隔一6962 bp的內(nèi)含子。和人β-防御素-2(hBD-2)等抗菌肽不同,hBD-1基因調(diào)控序列中未發(fā)現(xiàn)NF-κB位點(diǎn)。然而,對(duì)hBD-1基因啟動(dòng)子活性和轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)的研究。本實(shí)驗(yàn)即針對(duì)這些問(wèn)題展開(kāi)研究,并著重探討B(tài)CG增強(qiáng)hBD-1基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機(jī)制。 首先,由于hBD-1基因的表達(dá)有組織特異性,我們運(yùn)用RT-PCR和Northern雜交方法探討了hBD-1基因在一些細(xì)胞株的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)表明肺腺上皮細(xì)胞SPC-A-1、肺上皮細(xì)胞A549和單核細(xì)胞THP-1表達(dá)hBD-1 mRNA。而在臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞ECV304、纖維母細(xì)胞FB和Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞株293中未檢測(cè)到hBD-1的表達(dá)。其中單核細(xì)胞THP-1表達(dá)hBD-1 mRNA是首次被發(fā)現(xiàn)。 其次,我們對(duì)hBD-1基因不同長(zhǎng)度啟動(dòng)子的啟動(dòng)活性做了研究。我們將不同長(zhǎng)度的hBD-1基因5′-端上游序列連接入無(wú)啟動(dòng)子的綠色熒光蛋白
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【圖文】：

總RNA電泳圖

圖2R-fPCR檢測(cè)研D一mRNA的組織特異性表達(dá)gZn“肚e卜s側(cè)陀i方eexPerSS三onof研D·1mRNA記en住五del}PC.RN，ngea吐venoc加I;1，SCP.A.1;2，A549;3，THP.CV304;5，F(xiàn)B;瓜293eeU.

圖6·575pEGFPhBD·1及·314pEGFPhBn·i質(zhì)粒鑒定g6dIne眨五ac幼noof·575EPGFP研D·1nad·314ns奴ucst.1·3:·314PEGFP研-D1ocns奴’Uct;今6h·575pED·1ocnst川ct;1nad:6PCRp找心uc;st2nad:5Plas.止ds山gktH認(rèn)dmnad國(guó)成allotge伍er;3nad:4加山羅s扭dad留乙

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2801640