本文關(guān)鍵詞：Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余物質(zhì)質(zhì)控方法研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗簡稱Hib結(jié)合疫苗,人體特別是2歲以下幼兒接種該疫苗后可以產(chǎn)生針對b型流感嗜血桿菌的特異性抗體而得到保護。b型流感嗜血桿菌莢膜抗原的組成是多聚核糖基核糖醇磷酸鹽(PRP),單純的PRP免疫原性很差,屬于T細(xì)胞非依賴性抗原,對于免疫系統(tǒng)還不成熟的2歲以下的嬰幼兒來說,必須將Hib莢膜多糖從TI抗原轉(zhuǎn)化為TD抗原,因此,需要使用化學(xué)手段將具有載體效應(yīng)的蛋白質(zhì)分子與Hib莢膜多糖共價結(jié)合起來,使莢膜多糖獲得載體效應(yīng),最終使該疫苗具有二次免疫后的加強免疫效果。 本文包括三個部分。第一部分是前言,這部分介紹了Hib疫苗的背景信息和主要生產(chǎn)工藝,回顧了多糖蛋白結(jié)合疫苗制造工藝中常用的化學(xué)聯(lián)接方法。第二部分是研究報告,針對溴化氰、CDAP(1-氰基-4-二甲基氨基-吡啶四氟化硼)、EDAC(碳二亞胺)和ADH(己二酸二酰肼)四種結(jié)合常用的化學(xué)物質(zhì)進行了分析方法的摸索和開發(fā),最終建立了能夠達到預(yù)定要求的四種方法,分別如下： 1、研究建立了Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余溴化氰檢測方法。該方法基于高效陰離子交換色譜串聯(lián)電化學(xué)檢測器,該方法樣品檢測速度快,單個樣品上樣分析只需10分鐘。并對該方法進行了全面的方法學(xué)驗證。驗證結(jié)果表明該方法專屬性好,最小定量限可以達到5μg／L,檢出范圍在10-1001μg/L時線性良好,是一個比較好的檢測Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余氰化物的方法。 2、研究建立了Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余CDAP檢測方法。該方法基于高效陽離子交換色譜串聯(lián)紫外檢測器,使用該方法對單個樣品上樣只需30分鐘就可完成分析。后期對該方法進行了方法學(xué)驗證,驗證結(jié)果表明該方法專屬性好,最小定量限可以達到16μg/L,檢出范圍在100-1000μg/L時線性良好,是一個比較好的檢測Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余CDAP的方法。 3、研究建立了Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余EDAC的檢測方法,該方法使用的設(shè)備是高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜,該方法專屬性好,最小定量限可以達到0.2μg/L,檢出范圍在10-100μg/L時線性良好。使用該方法對單個樣品上樣只需5-8分鐘就可完成分析。后期對該方法進行了方法學(xué)驗證。驗證結(jié)果表明該方法操作簡便,數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠,是一個比較好的檢測Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余EDAC的方法。 4、研究建立了Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余ADH的檢測方法。該辦法采用了化學(xué)顯色分光光度法,耗時短,操作簡便,檢測成本低廉。后期對該方法進行了方法學(xué)驗證。驗證結(jié)果表明,該方法專屬性好,檢出范圍在2-20μg/mL時線性良好,測定范圍可以低至1μg/mL,是一個比較好的檢測Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余ADH的方法。 第三部分是研究結(jié)論、展望和體會。通過本研究建立的四種檢測方法有效、可靠,可以用來對相關(guān)物質(zhì)殘余水平進行定量分析,為相關(guān)生產(chǎn)工藝的驗證提供了方法上的支持,有利于Hib結(jié)合疫苗的質(zhì)量控制,進一步提高了疫苗的質(zhì)量。在多糖蛋白結(jié)合疫苗這一領(lǐng)域,不同的結(jié)合方法需要不同的化學(xué)物質(zhì),因此,為保證疫苗的安全性,在殘余物質(zhì)監(jiān)控上還有很多的工作可以進行。
【關(guān)鍵詞】：Hib結(jié)合疫苗 殘余物質(zhì) 質(zhì)量控制 色譜 分光光度法
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：O657;R392
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 目錄7-9
• 第一章 前言9-27
• 1.1 b型流感嗜血桿菌多糖蛋白結(jié)合疫苗9-14
• 1.1.1 Hib疾病9
• 1.1.2 病原體9-10
• 1.1.3 傳播途徑及發(fā)病機理10
• 1.1.4 流行病學(xué)10
• 1.1.5 第一支b型流感嗜血桿菌疫苗10-11
• 1.1.6 結(jié)合疫苗11-12
• 1.1.7 結(jié)合疫苗的效果12-13
• 1.1.8 b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗的質(zhì)量控制13-14
• 1.2 b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗的生產(chǎn)制造14-20
• 1.2.1 生產(chǎn)過程14-17
• 1.2.2 過程控制17-20
• 1.3 多糖蛋白結(jié)合疫苗中常用的結(jié)合策略20-27
• 1.3.1 還原胺化20-22
• 1.3.2 硫醚連接22
• 1.3.3 通過肟鍵形成的復(fù)合物22-23
• 1.3.4 同型雙功能連接劑23-24
• 1.3.5 通過環(huán)加成進行結(jié)合24-25
• 1.3.6 施陶丁格連接法25-27
• 第二章 Hib結(jié)合疫苗中殘余物質(zhì)檢測方法的建立27-58
• 2.1 Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余溴化氰檢測方法的建立27-36
• 2.1.1 引言27
• 2.1.2 實驗部分27-29
• 2.1.3 結(jié)果與討論29-36
• 2.2 Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余CDAP檢測方法的建立36-44
• 2.2.1 引言36
• 2.2.2 實驗部分36-38
• 2.2.3 結(jié)果與討論38-44
• 2.3 Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余EDAC檢測方法的建立44-52
• 2.3.1 引言44
• 2.3.2 實驗部分44-46
• 2.3.3 結(jié)果與討論46-52
• 2.4 Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余ADH檢測方法的建立52-58
• 2.4.1 引言52
• 2.4.2 實驗部分52-54
• 2.4.3 結(jié)果與討論54-58
• 第三章 結(jié)論58-61
• 3.1 實驗結(jié)論58-59
• 3.2 研究展望59
• 3.3 課題研究心得體會59-61
• 參考文獻61-63
• 在學(xué)期間的研究成果63-64
• 致謝64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊麗華;謝欣;吳梅;司楊樂;孫慧軍;楊忠輝;;已二酰肼及溴化氰檢測方法重復(fù)性研究[J];微生物學(xué)雜志;2006年05期

  本文關(guān)鍵詞：Hib多糖蛋白結(jié)合疫苗中殘余物質(zhì)質(zhì)控方法研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：275997