本文關(guān)鍵詞：sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素細(xì)胞黑素形成作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：黑素細(xì)胞來(lái)源于神經(jīng)嵴，在發(fā)育過(guò)程中逐漸遷移至表皮后形成毛囊中的黑素干細(xì)胞，其主要功能是合成黑色素維持皮膚的正常著色。目前的研究發(fā)現(xiàn)Wnt信號(hào)通路對(duì)黑素細(xì)胞的發(fā)育和分化具有重要的調(diào)控作用，分泌型卷曲相關(guān)蛋白（sFRPs）是Wnt信號(hào)通路的拮抗因子，因其結(jié)構(gòu)上與Wnt受體極為相似而發(fā)揮調(diào)節(jié)Wnt信號(hào)通路的作用。本課題著重于研究sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素細(xì)胞的作用，首先在體檢測(cè)sFRP5在毛囊黑素中的表達(dá)情況，并以永生化的黑素細(xì)胞為體外模型,利用腺病毒表達(dá)載體，通過(guò)檢測(cè)黑素分化標(biāo)志物的表達(dá)來(lái)明確sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素母細(xì)胞分化和黑素形成的作用以及對(duì)Wnt/β-catenin經(jīng)典通路的影響，最后以DCT-LacZ轉(zhuǎn)基因小鼠為模型，在體觀察sFRP5對(duì)黑素細(xì)胞的影響。主要結(jié)果如下： 1. sFRP5在毛囊黑素中表達(dá)情況的研究 采用免疫組化法檢測(cè)sFRP5在小鼠毛囊黑素譜系中的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在生長(zhǎng)期sFRP5蛋白在Bulge的外根鞘以及外根鞘和毛基質(zhì)之間的部位表達(dá)，在退化期sFRP5蛋白的表達(dá)減少，在靜止期幾乎未檢測(cè)出sFRP5的表達(dá)。sFRP5mRNA的表達(dá)情況與免疫組化結(jié)果一致。 2.sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素細(xì)胞作用的體外研究 以永生化的黑素細(xì)胞為模型，利用腺病毒表達(dá)載體，設(shè)置Control組、Wnt3a處理組、 Wnt3a+sFRP5處理組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)黑素細(xì)胞黑素形成能力和分化標(biāo)志物的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：L-DOPA測(cè)定酪氨酸酶活性結(jié)果顯示W(wǎng)nt3a+sFRP5處理組酪氨酸酶活性低于Wnt3a處理組，Masson-Fontanas銀染色法和NaOH裂解法定量檢測(cè)黑素含量顯示W(wǎng)nt3a+sFRP5處理組形成的黑素明顯降低，RT-PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示W(wǎng)nt3a+sFRP5處理組能下調(diào)TRP-1、TYR、MITF基因和蛋白的表達(dá)。 3.sFRP5對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的影響 運(yùn)用RT-PCR、Western blot和Top-luc熒光素酶報(bào)告基因分析β-catenin的表達(dá)情況，，結(jié)果如下:Wnt3a+sFRP5處理組β-catenin的基因和蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)，熒光素酶報(bào)告基因分析結(jié)果一致。 4. sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素細(xì)胞作用的體內(nèi)研究 運(yùn)用DCT-LacZ轉(zhuǎn)基因小鼠模型在毛囊靜止期皮內(nèi)注射腺病毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：注射后8天可以見到Ad-Wnt3a處理部位皮膚顏色明顯變黑，Ad-GFP和Ad-Wnt3a+Ad-sFRP5注射部位皮膚為粉色；組織學(xué)切片HE染色顯示Ad-Wnt3a處理組小鼠皮膚毛囊中的成熟黑素細(xì)胞明顯增多，Ad-Wnt3a+Ad-sFRP5聯(lián)合處理組未觀察到成熟的黑素細(xì)胞。 本課題首次證明了sFRP5在小鼠毛囊周期黑素細(xì)胞譜系中的表達(dá)情況，并且從體內(nèi)和體外兩個(gè)方面證明sFRP5抑制了Wnt3a促進(jìn)黑素形成的作用，該實(shí)驗(yàn)為研究黑素干細(xì)胞分化調(diào)節(jié)的機(jī)制提供了另一途徑，對(duì)臨床上色素脫失性疾病如白癜風(fēng)的治療也有很好的提示作用。
【關(guān)鍵詞】：sFRP5 Wnt3a 黑素細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-15
• 第一部分 sFRP5 調(diào)節(jié) Wnt3a 對(duì)黑素細(xì)胞作用的體外研究15-38
• 引言15
• 1 材料與方法15-28
• 2 結(jié)果28-34
• 3 討論34-36
• 小結(jié)36-38
• 第二部分 sFRP5 調(diào)節(jié) Wnt3a 對(duì)黑素細(xì)胞作用的體內(nèi)研究38-47
• 引言38
• 1 材料與方法38-42
• 2 結(jié)果42-45
• 3 討論45-46
• 小結(jié)46-47
• 全文總結(jié)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 文獻(xiàn)綜述51-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 致謝58-59
• 碩士期間發(fā)表論文59-60

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 賈虹;黑素細(xì)胞的生物學(xué)和黑素生成的新進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2002年02期

2 曹文新,吳士明,唐建民;超快脈沖激光對(duì)黑素細(xì)胞作用及機(jī)制[J];激光雜志;2002年02期

3 侯麥花,朱文元;黑素細(xì)胞特異性基因的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(皮膚性病學(xué)分冊(cè));2003年05期

4 趙小東,劉仲榮,孫林潮,張海龍,廖文俊,王冬青,高天文,劉玉峰;兩種培養(yǎng)狀態(tài)下黑素細(xì)胞的生物學(xué)特征比較[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2004年02期

5 尉曉冬,許愛娥;傳代培養(yǎng)的黑素細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的研究[J];中華皮膚科雜志;2004年06期

6 盧濤,劉源,金巖,高天文,董蕊,李強(qiáng);兩段法培養(yǎng)適合臨床移植應(yīng)用的黑素細(xì)胞的安全性研究[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年17期

7 盧濤,金巖,高天文,劉源,劉小亮,趙小東;皮膚細(xì)胞懸液移植的基礎(chǔ)研究:人黑素細(xì)胞膜片體外附著生長(zhǎng)觀察[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年26期

8 岳學(xué)狀,朱文元,馬慧軍,王大光,李誠(chéng)讓;表沒食子兒茶素沒食子酸酯對(duì)人表皮黑素細(xì)胞黑素合成的影響及機(jī)制[J];臨床皮膚科雜志;2005年12期

9 楊紅;王克玉;張向紅;王奕;;過(guò)氧化氫對(duì)體外培養(yǎng)的黑素細(xì)胞形態(tài)及功能的影響[J];中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志;2006年07期

10 谷梅;柏志全;肖瑞;江振友;;過(guò)氧化氫對(duì)黑素細(xì)胞生物學(xué)作用的研究[J];嶺南皮膚性病科雜志;2006年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 堅(jiān)哲;李凱;張瑩;王玲;王志勇;劉玲;李春英;高天文;;過(guò)氧化氫誘導(dǎo)人黑素細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型的建立[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 王玲;李承新;朱東寧;堅(jiān)哲;;Q開關(guān)ND:YAG 1064nm激光照射對(duì)體外培養(yǎng)的人表皮黑素細(xì)胞黑素合成的影響[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 盧濤;高天文;劉玉峰;李春英;李強(qiáng);高鴿;曹云新;;一種安全簡(jiǎn)便的黑素細(xì)胞體外培養(yǎng)法[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

4 訾紹霞;連石;朱威;;天然植物成份對(duì)黑素生成的影響及作用機(jī)制的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

5 龔石;張晴;劉巧;楊先旭;吳曉強(qiáng);吳偉偉;;含己烯雌酚血清對(duì)體外培養(yǎng)正常人表皮黑素細(xì)胞的作用[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

6 王玲;李承新;朱東寧;堅(jiān)哲;;Q開關(guān)ND:YAG 1064nm激光照射對(duì)體外培養(yǎng)的人表皮黑素細(xì)胞黑素合成的影響[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會(huì)20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

7 羅衛(wèi);趙廣;向德培;王雅琴;朱美材;;自體黑素細(xì)胞培養(yǎng)移植治療白癜風(fēng)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

8 唐顯華;劉志軍;;黑素細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會(huì)20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

9 項(xiàng)蕾紅;;黑素細(xì)胞生物學(xué)特性研究與臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

10 楊寧;李大鐵;谷琪;陳康;龍際;楊琴;華鵬;;強(qiáng)脈沖熒光不同波長(zhǎng)對(duì)豚鼠皮膚色素和表皮黑素細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)觀察[A];第4屆中國(guó)美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張中橋;兩段法培養(yǎng)的黑素細(xì)胞應(yīng)用安全[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

2 張中橋;含黑素細(xì)胞的表皮替代物構(gòu)建成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

3 吳一福;移植同種異體黑素細(xì)胞治療白癜風(fēng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

4 楊麗佳邋通訊員 吳倪娜;激活前黑素細(xì)胞可治白癜風(fēng)[N];健康報(bào);2008年

5 北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院 李映琳;“黑白同治”雙向調(diào)節(jié)[N];健康報(bào);2009年

6 吳一福;浮萍和紫丹參治療白癜風(fēng)有據(jù)可依[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

7 小瓊;手掌為什么曬不黑[N];山西科技報(bào);2000年

8 張學(xué)全;黑素細(xì)胞移植治療白癜風(fēng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

9 本報(bào)記者 馬曉林 通訊員 廖艷苗;病因眾說(shuō)紛紜 治療方案不一[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2002年

10 ;少年白頭為哪般？[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 譚城;中藥單體對(duì)黑素合成的影響及黑素細(xì)胞分化標(biāo)記分子在毛囊及白癜風(fēng)皮損處的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2002年

2 馬慧軍;中藥單體促黑素合成作用及毛囊外根鞘無(wú)色素性黑素細(xì)胞激活和移行的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

3 王大光;人毛囊外毛根鞘無(wú)色素黑素細(xì)胞的激活與移行和中藥淫羊藿苷等抑制黑素瘤細(xì)胞及黑素細(xì)胞黑素生成的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

4 劉棟;皮質(zhì)類固醇、維甲酸、積雪草甙對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2003年

5 湯蘆艷;維生素D衍生物治療白癜風(fēng)的臨床觀察及對(duì)黑素細(xì)胞生物學(xué)作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

6 盧濤;利用組織工程技術(shù)探索同種異體黑素細(xì)胞移植治療白癜風(fēng)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 李強(qiáng);白癜風(fēng)相關(guān)黑素細(xì)胞膜抗原的分析及鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 張瑩;miR-423-5p調(diào)控過(guò)氧化氫誘導(dǎo)下人黑素細(xì)胞氧化損傷的機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

9 安彩霞;氨甲環(huán)酸對(duì)人培養(yǎng)黑素細(xì)胞生物學(xué)影響和相關(guān)分子機(jī)制的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

10 解士海;人表皮黑素細(xì)胞—角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)及11種化合物對(duì)黑素沉著的影響研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊紅;人表皮黑素細(xì)胞體外培養(yǎng)及過(guò)氧化氫對(duì)黑素細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2006年

2 王磊;紫外線對(duì)人皮膚黑素細(xì)胞生長(zhǎng)及黑素生成的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

3 牛建榮;熱應(yīng)激對(duì)體外培養(yǎng)人黑素細(xì)胞生長(zhǎng)及黑素合成的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 王芳;白介素-10，白介素-17，白介素-22，白介素-23對(duì)人表皮黑素細(xì)胞生物活性的影響[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2012年

5 李陽(yáng);殼聚糖復(fù)合膜上及移植部位黑素細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

6 周舟;甲硫氨酸硫氧化物還原酶A對(duì)氧化應(yīng)激狀態(tài)下黑素細(xì)胞活性的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

7 閆翠彥;他克莫司對(duì)淋巴細(xì)胞的作用及對(duì)黑素細(xì)胞的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

8 王玲;Q開關(guān)Nd:YAG1064nm激光照射對(duì)人表皮黑素細(xì)胞生物學(xué)及黑素合成的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

9 鄭錦芬;白藜蘆醇對(duì)培養(yǎng)的人黑素細(xì)胞的影響[D];汕頭大學(xué);2009年

10 李強(qiáng);白癜風(fēng)相關(guān)黑素細(xì)胞膜抗原的分析及純化[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

  本文關(guān)鍵詞：sFRP5抑制Wnt3a對(duì)黑素細(xì)胞黑素形成作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：275981