【摘要】：生長激素(growth hormone，GH)除對機(jī)體促進(jìn)生長發(fā)育外，還有重要的調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能的作用。近年來有證據(jù)表明淋巴細(xì)胞表面有GH的受體存在，并且淋巴細(xì)胞也能分泌GH，稱為淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)性GH(immunoreactive growth hormone，irGH)。所以神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)之間可通過GH將信息相互傳遞，從而維持機(jī)體的生理平衡和穩(wěn)定。目前，GH與淋巴細(xì)胞功能之間的關(guān)系已成為神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一，前一階段人們的研究主要集中在細(xì)胞水平的研究，且各實(shí)驗(yàn)室研究的結(jié)果也不一致。為了對GH與淋巴細(xì)胞之間的關(guān)系有一個(gè)深入的認(rèn)識，本研究從分子水平探討淋巴細(xì)胞irGH的分泌調(diào)控機(jī)制以及內(nèi)外源性GH對淋巴細(xì)胞表達(dá)IL-2R，，分泌IL-2、IFN-γ的影響。 本研究首先以正常人外周血淋巴細(xì)胞DNA為模板，根據(jù)人垂體生長激素基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)合成一對寡核苷酸引物，通過PCR擴(kuò)增出人淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)生長激素(irGH)基因5’近端的調(diào)控序列，然后將其與質(zhì)粒PGEM7Zf(+)連接，經(jīng)轉(zhuǎn)化、藍(lán)白斑篩選、酶切鑒定，獲得PGEM7Zf(+)—irGH DNA(-484—+2bp)重組質(zhì)粒，序列分析結(jié)果證實(shí)與垂體細(xì)胞GH基因的5’近端調(diào)控序列的核苷酸順序完全相同。 將已克隆的GH基因調(diào)控序列片段(-484—+2bp)插入PGL2-Basic-luc中，構(gòu)建成PGL2-GH-luc熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒，并轉(zhuǎn)染入Jurkat細(xì)胞，研究GH、GHRH、TRH、IGF-1和SS對淋巴細(xì)胞中irGH分泌的調(diào)控作用。結(jié)果表明：GH、GHRH對irGH的表達(dá)有明顯的抑制作用(約50％)，且不依賴于劑量，高劑量的SS和TRH(100nM)對irGH的表達(dá)也有抑制作用(85％左右)，表明淋巴細(xì)胞irGH的分泌調(diào)節(jié)與垂體GH的不完全相同。 為了研究淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子對irGH的調(diào)節(jié)作用，我們將PGL2-GH-luc熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入Jurkat細(xì)胞后，觀察IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-β和IFN-γ對淋巴細(xì)胞irGH分泌的調(diào)控作用。結(jié)果表明：生理劑量的IL-1β、TNF-β和IFN-γ對irGH的表達(dá)有明顯的抑制作用，高劑量的IL-1β、IL-2和IL-6(100u-1000u)對irGH的表達(dá)也有明顯的抑制作用，而高劑量TNF-β則沒有明顯作用。激素和細(xì)胞因子對irGH的表達(dá)主要是起抑制作
【圖文】：

PGLZ一GH一lu
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1999
【分類號】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉軍喜,鄭德先,鄧潔英,史軼蘩;人淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)性生長激素 cDNA 的克隆、序列測定與垂體生長激素 cDNA 的比較[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;1997年01期

2 劉軍喜，鄭德先，鄧潔英，史軼蘩;人淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)性生長激素mRNA的擴(kuò)增與鑒定[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);1996年05期

本文編號：2595936