【摘要】： 有機(jī)磷殺蟲劑毒死蜱(CPF)在全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和公共衛(wèi)生項(xiàng)目中的廣泛使用,已經(jīng)引起了嚴(yán)重的環(huán)境污染和健康危害,包括急、慢性人類中毒。視網(wǎng)膜也是CPF作用的靶器官之一。但目前對(duì)其中毒機(jī)制還不十分明了。以前的研究主要側(cè)重于CPF對(duì)視網(wǎng)膜細(xì)胞中乙酰膽堿酯酶活性的抑制作用。本研究主要是探討CPF能否誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞產(chǎn)生氧化脅迫并致其凋亡,而聯(lián)合應(yīng)用維生素C和E對(duì)CPF的視毒性是否有抑制作用。 試驗(yàn)小鼠被隨機(jī)分成4組(每組20只):對(duì)照組(Control);維生素C加維生素E處理組(VC+VE);毒死蜱處理組(CPF);和CPF加維生素C和維生素E處理組(CPF+VC+VE)。VC+VE組和CPF+VC+VE組用維生素C 250 mg/kg和維生素E 150mg/kg預(yù)處理,皮下注射,每天1次,持續(xù)6天。其它組同時(shí)皮下注射生理鹽水。之后,CPF組和CPF+VC+VE組通過強(qiáng)迫飼喂給予CPF(63 mg/kg),該劑量為半致死劑量的1/4。 在CPF處理24小時(shí)后,所有的鼠麻醉后被殺死,摘除視網(wǎng)膜。部分視網(wǎng)膜被用來做電鏡標(biāo)本,觀察其細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變,以及用共聚焦顯微鏡檢測鈣離子濃度。部分視網(wǎng)膜被分離成單細(xì)胞懸液進(jìn)行彗星電泳,AO/EB雙重染色,以及用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。剩余的視網(wǎng)膜被制成勻漿用來檢測丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,過氧化氫酶(CAT)活性,谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活性和乙酰膽堿酯酶(AChE)活性。 結(jié)果顯示:CPF組小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞中產(chǎn)生了脂質(zhì)過氧化,DNA損害程度增強(qiáng),部分細(xì)胞發(fā)生凋亡,同時(shí)抗氧化酶SOD、CAT和GPX的活性降低,而抗氧化劑維生素C和E的聯(lián)合使用則可以明顯抑制CPF的這些細(xì)胞毒作用,這說明CPF所誘導(dǎo)的小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡確實(shí)是由氧化脅迫造成的。我們還觀察到,CPF還可以抑制小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞中的AChE活性,并促進(jìn)其胞內(nèi)鈣離子濃度增加,而聯(lián)合應(yīng)用維生素C和E,對(duì)這些作用具有明顯和有效的抑制效果。 我們的結(jié)果說明:①有機(jī)磷殺蟲劑CPF可經(jīng)由氧化脅迫途徑誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡,在該過程中CPF降低了AChE活性并增加了細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度。本研究結(jié)果有助于進(jìn)一步闡明CPF和其它有機(jī)磷殺蟲劑引起中毒的機(jī)制;②外源性抗氧化劑維生素C和E的聯(lián)合應(yīng)用,明顯地降低了CPF對(duì)小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞的損害作用。上述研究結(jié)果提示,在臨床治療有機(jī)磷殺蟲劑引起的視毒性時(shí),除了使用傳統(tǒng)的解毒劑進(jìn)行治療外,如果再結(jié)合使用維生素C和E的抗氧化治療,也許會(huì)收到更好的效果。
【圖文】：

結(jié)果蘭州在e和D中=5林m。Fig.3.Morphologiealchangesinmouseretinaindueedbyeh63mg/kg)for24h.CometassayshowedasingleeellwithateleetroPhoresis(A).Aeridineorange一stainedeellsshowednuelearfrformationofaPol)totiebodies(arrowheads)(B).Transmissioneleeshowedchromatinmass(arrowheads)innueleusoftheretinvacuolizationof‘:ellorganelles(arrowheads)andehondriosome(bar=ZOO林minAandB;=5林minCandD.

結(jié)果蘭州人PF可誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞中的活質(zhì)分子的損傷經(jīng)CPF處理24h后，小鼠視網(wǎng)膜產(chǎn)生了活質(zhì)分子包括脂質(zhì)和A，一種脂質(zhì)氧化損害的標(biāo)志物(Zhangetal.，2004)檢測到的表達(dá)DNA損害的拖尾現(xiàn)象也增加了(圖增加了(圖5B)。此外，，、CAT和GPX的活性與對(duì)照組比較均降低了(圖6)。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R363

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 徐維娜;敵百蟲對(duì)異育銀鯽抗氧化應(yīng)激系統(tǒng)的影響及抗壞血酸對(duì)魚體的保護(hù)作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2573418