【摘要】： 樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)是唯一可以誘導(dǎo)初始型T細(xì)胞(naive T cell)活化的專職抗原遞呈細(xì)胞(APC),未成熟DCs(iDCs)能夠維持外周耐受,而成熟DCs(mDCs)能夠刺激效應(yīng)性T細(xì)胞。DCs能分泌一種直徑約為30-100 nm的微小膜囊泡體(exosomes),稱Dex,表達(dá)一些與DCs功能相關(guān)的分子,如MHC-Ⅰ、Ⅱ類分子、共刺激分子B7以及黏附分子CD54等,Dex的功能取決于其來源細(xì)胞類型及其成熟的狀態(tài)。 為了探討樹突狀細(xì)胞(DCs)分泌的exosomes(Dex)誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫耐受作用,研究供體Dex降低同種異體移植排斥的可能性。體外誘導(dǎo)和培養(yǎng)正常人外周血單個核細(xì)胞來源的iDCs,并負(fù)載其自身凍融抗原,用lipopolysaccharide(LPS)促其成熟,流式檢測iDCs和mDCs的表型;采用超速離心和超濾的方法分離純化iDCs分泌的Dex(iDex)和mDCs分泌的Dex(mDex);以混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)作為同種異體移植體外模型,CCK-8法比較iDex和mDex的生物學(xué)功能。結(jié)果顯示,異源的iDex在iDCs存在時能夠抑制MLR中T細(xì)胞增殖反應(yīng),而異源的mDex在mDCs存在時則增強(qiáng)MLR中T細(xì)胞增殖反應(yīng)。因此mDCs來源的mDex,能夠活化T細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答,在抗腫瘤免疫治療中具有誘人的前景;相反iDCs來源的iDex可以誘導(dǎo)外周免疫耐受,在同種異體移植耐受中起重要作用,將成為防止移植排斥反應(yīng)以及治療自身免疫性疾病的一種新方法。 同時,為了進(jìn)一步研究調(diào)節(jié)性DCs分泌的rDex誘導(dǎo)的免疫耐受作用途徑和分子機(jī)制,為抗腫瘤,預(yù)防移植排斥,治療自身免疫性疾病等臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ),用TGF-β1聯(lián)合IL-10誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性DCs,流式細(xì)胞儀檢測調(diào)節(jié)性DCs和正常DCs的表面標(biāo)志及吞噬功能,并用Bradford法檢測它們分泌Dex的能力;Western-Blot方法檢測并比較iDCs分泌的Dex(iDex)與調(diào)節(jié)性DCs分泌的Dex(rDex)表達(dá)的相關(guān)分子;通過CCK-8法分析異源iDex和rDex在MLR中抑制T細(xì)胞增殖作用的效果,比較rDex與iDex誘導(dǎo)免疫耐受的能力。結(jié)果顯示,TGF-β1和IL-10可下調(diào)DCs表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表達(dá),并誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性DCs分泌更多的rDex;rDex抑制T細(xì)胞增殖作用顯著強(qiáng)于iDex;rDex表達(dá)更多的FasL,提示TGF-β1和IL-10誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性DCs分泌的rDex在免疫耐受中發(fā)揮重要作用,有望應(yīng)用于同種異體移植抗免疫排斥反應(yīng)。
[Abstract]:Dendritic cells (dendritic cells,DCs) are the only full-time antigen presenting cells that can induce (naive T cell) activation of initial T cells. (APC), immature DCs (iDCs) can maintain peripheral tolerance. Mature DCs (mDCs) can stimulate effector T cells. DCS can secrete a microvesicular vesicle (exosomes), with a diameter of about 30 脳 100 nm. (exosomes), says that Dex, expresses some molecules related to DCs function, such as MHC- class 鈪，

本文編號：2495515