【摘要】： 目的分析結(jié)核分枝桿菌katG、inhA基因突變與耐異煙肼的相關(guān)性,并通過(guò)核酸薄膜導(dǎo)流雜交技術(shù)快速檢測(cè)基因突變,初步判斷有無(wú)結(jié)核分枝桿菌感染并提示其耐藥性。方法對(duì)貴州省遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸二科結(jié)核病區(qū)2007年6月至2008年11月期間住院病人進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、菌型鑒定及藥物敏感性試驗(yàn),在培養(yǎng)菌落中提取細(xì)菌DNA,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,將所有擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列分析,并將DNA測(cè)序結(jié)果與藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比；將測(cè)序中檢測(cè)到的與耐異煙肼相關(guān)的katG基因315位點(diǎn)的突變形式設(shè)計(jì)成寡核苷酸探針,并制成載有探針的薄膜,對(duì)上述87例標(biāo)本中存在katG基因315位點(diǎn)突變的18例菌株和15例katG基因野生型菌株共33例進(jìn)行雜交測(cè)試。結(jié)果87例菌株經(jīng)鑒定均為結(jié)核分枝桿菌,30(34.5%)例為耐異煙肼菌株,57(65.5%)例為異煙肼敏感菌株；87株結(jié)核分枝桿菌菌株中共21株(24.1%)出現(xiàn)katG基因突變,其中18株出現(xiàn)在315位點(diǎn)；24例(27.6%)出現(xiàn)inhA基因突變；8例(9.2%)顯示雙基因聯(lián)合突變。30例耐異煙肼株中,18(60%)株出現(xiàn)katG和(或)inhA基因突變,12株未出現(xiàn)此兩基因突變；18株中有9(50%)株為katG單基因突變,5(27.8%)株為inhA單基因突變,4(22.2%)株為katG和inhA雙基因聯(lián)合突變。katG基因兩個(gè)新突變位點(diǎn)(Val230Met和Pro232Gln)為國(guó)內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn),已被美國(guó),歐洲和日本的基因庫(kù)收錄。雜交測(cè)試的33例菌株均顯示有目的基因,與DNA測(cè)序結(jié)果符合率為93.9%(31／33),與DNA測(cè)序相比,其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、敏感度、特異度分別為100%、86.7%、90%、100%。結(jié)論結(jié)核分枝桿菌katG、inhA基因突變與異煙肼耐藥相關(guān),可通過(guò)檢測(cè)基因突變初步判斷結(jié)核分枝桿菌耐藥性,核酸薄膜導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測(cè)基因突變高效快速,為結(jié)核分枝桿菌耐藥性的快速檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2485891