發(fā)布時(shí)間：2019-03-27 16:42

【摘要】： 目的:利用小鼠到大鼠異種異位心臟移植模型,研究供體未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)急性血管性排斥反應(yīng)(acute vascular rejection,AVR)的影響,探討異種心臟移植免疫耐受機(jī)制。 方法:兩組體外培養(yǎng)的小鼠骨髓細(xì)胞,分別采用常規(guī)劑量(GM~(hi))和低劑量(GM~(lo))GM-CSF誘導(dǎo),使其分化為樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)。倒置顯微鏡觀察兩組DC(GM~(hi)DC和GM~(lo)DC)形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC表面CD11c、CD86、MHC-Ⅱ及混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DC對(duì)異種T細(xì)胞的增殖能力的影響來(lái)鑒定DC的純度及成熟度。成功獲得小鼠骨髓源樹(shù)突狀細(xì)胞,行小鼠到大鼠頸部心臟移植。小鼠和SD大鼠分別作為供受體,隨機(jī)分為三組,A組(對(duì)照組):僅行小鼠到大鼠頸部心臟移植;B組(GM~(hi)DC組):受體靜脈注射GM~(hi)DC后第7天行小鼠到大鼠頸部心臟移植;C組(GM~(lo)DC組):受體靜脈注射GM~(lo)DC后第7天行小鼠到大鼠頸部心臟移植。測(cè)定移植前一天各組受體外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例及血清IL-10、TGF-β1水平、記錄各組移植心臟的存活時(shí)間和病理變化。 結(jié)果:(1)GM-CSF培養(yǎng)小鼠骨髓前體細(xì)胞所得細(xì)胞CD11c陽(yáng)性率:常規(guī)劑量組為71.94±2.92%,低劑量組為70.46±2.53%,兩者無(wú)顯著性差異(P 0.05)。(2)CD11c+細(xì)胞(DC)表面MHCII、CD86表達(dá):GM~(hi)DC分別為66.47±2.55%、11.43±1.87%,GM~(lo)DC分別為59.92±3.50%、0.98±0.56%。GM~(hi)DC表面MHCII陽(yáng)性率較GM~(lo)DC高表達(dá)(P 0.05),GM~(hi)DC表面CD86陽(yáng)性率較GM~(lo)DC高(P 0.05)。(3)MLR測(cè)得吸光度(optical density,OD)值:GM~(hi)DC組為1.1±0.08,GM~(lo)DC組為0.60±0.03;刺激效應(yīng):GM~(hi)DC組為173.81±10.05%,GM~(lo)DC組為49.03±5.54%,兩組比較有顯著性差異(P0.05)。(4)供心存活時(shí)間:A組:1.98±0.51天,B組:1.8±0.57天,C組:3.2±0.27天,A與B組組間比較P㧐0.05,C組較A組和B組延長(zhǎng)(P 0.05)。(5)移植后供心病理:A組、B組、C組呈急性血管排斥反應(yīng)。(6)大鼠外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例:A組:2.7±0.57%,B組:2.89±0.81%,C組:5.54±1.18%,A與B組比較P㧐0.05,C組較A組和B組高(P 0.05)。(7)大鼠血清IL-10、TGF-β1水平:A組:18.87±2.69 pg/ml、25.78±3.26 pg/ml,B組:20.74±5.36 pg/ml、27.07±5.24 pg/ml,C組:26.12±4.88 pg/ml、34.00±3.80 pg/ml,A與B組比較P㧐0.05,C組較A組和B組高(P 0.05)。 結(jié)論:利用GM-CSF誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓前體細(xì)胞,能得到足量純度較高的樹(shù)突狀細(xì)胞。常規(guī)劑量組培養(yǎng)所獲得的DC(GM~(hi)DC)為成熟DC與未成熟DC的混合體,表型為CD11c+、MHCIIhi、CD86+;而低劑量組培養(yǎng)所獲得的DC(GM~(lo)DC)為較為單一的未成熟DC,表型為CD11c+、MHCIIlow、CD86_。GM~(lo)DC與GM~(hi)DC相比,體外刺激異種T淋巴細(xì)胞的增殖能力較弱。靜脈注射供者imDC對(duì)異種心臟移植受體AVR有一定的抑制作用,可以延長(zhǎng)供心存活時(shí)間。這可能與imDC誘導(dǎo)產(chǎn)生CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞有關(guān)。細(xì)胞接觸機(jī)制和細(xì)胞因子可能都參與了CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞誘導(dǎo)免疫耐受的過(guò)程。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 牟海波,林茂芳,岑洪,黃河;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抑制樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟及下調(diào)TLR4的表達(dá)[J];中國(guó)病理生理雜志;2005年08期

2 趙鴻,古濤,王翔,丁強(qiáng),張?jiān)?白細(xì)胞介素-10誘導(dǎo)的大鼠樹(shù)突狀細(xì)胞體外免疫功能的研究[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年05期

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本文編號(hào)：2448357