【摘要】：目的探討攜帶肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)基因的減毒沙門菌體外促血管形成的效應(yīng)。方法構(gòu)建攜帶HGF基因真核表達(dá)載體的減毒沙門菌菌株(TPH),體外轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)后觀察目的基因表達(dá)及其增殖活性;評(píng)價(jià)TPH的細(xì)胞表達(dá)上清對(duì)雞胚絨膜尿囊膜血管生成效應(yīng)的刺激效應(yīng)。結(jié)果構(gòu)建的TPH菌株在體外可有效轉(zhuǎn)染HUVEC并表達(dá)有活性的HGF蛋白,6×10~5個(gè)HUVEC細(xì)胞可表達(dá)160~190 ng的HGF蛋白,和對(duì)照組相比,TPH轉(zhuǎn)染組細(xì)胞表達(dá)上清可明顯促進(jìn)HUVEC增殖,而且具有劑量-效應(yīng)關(guān)系;TPH轉(zhuǎn)染組細(xì)胞表達(dá)上清也刺激雞胚絨膜尿囊膜小血管生成,其血管數(shù)量(133.0±11.5)/cm~2明顯大于轉(zhuǎn)染TP的HUVEC細(xì)胞上清組(83.3±5.5)/cm~2和對(duì)照組(62.7±7.1)/cm~2(P0.05)。結(jié)論攜帶HGF基因的減毒沙門菌可有效轉(zhuǎn)染HUVEC并促進(jìn)細(xì)胞增殖,刺激小血管新生,可能在組織創(chuàng)面愈合中起重要作用,在胃潰瘍治療中有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of attenuated salmonella carrying hepatocyte growth factor (HGF) gene on angiogenesis in vitro. Methods (TPH), a attenuated Salmonella strain carrying the eukaryotic expression vector of HGF gene, was constructed and transfected into human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) in vitro to observe the expression of the target gene and its proliferative activity. To evaluate the stimulating effect of supernatant of TPH expression on the angiogenesis of chorioallantoic membrane in chicken embryo. Results the constructed TPH strain could effectively transfect HUVEC and express active HGF protein in vitro. 6 脳 10 ~ 5 HUVEC cells could express 160 ~ 190 ng HGF protein. Compared with the control group, the expression supernatant of TPH transfected cells could significantly promote the proliferation of HUVEC. Moreover, there is a dose-effect relationship. The supernatant of TPH transfected cells also stimulated the formation of small vessels in chorioallantoic membrane of chicken embryo. The number of blood vessels (133.0 鹵11.5) / cm~2 was significantly higher than that in the supernatant of HUVEC cells transfected with TP (83.3 鹵5.5) / cm~2 and in the control group (62.7 鹵7.1) / cm~2 (P0.05). Conclusion attenuated Salmonella carrying HGF gene can effectively transfect HUVEC, promote cell proliferation and stimulate small angiogenesis, which may play an important role in wound healing and have potential application value in the treatment of gastric ulcer.
【作者單位】： 蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院檢驗(yàn)中心/甘肅省干細(xì)胞與基因藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81273568) 甘肅省杰出青年基金(2011GS03841) 解放軍總后勤部后勤科研項(xiàng)目(CLZ11J09)
【分類號(hào)】：R378.22

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本文編號(hào)：2421061