發(fā)布時(shí)間：2018-12-08 15:21

【摘要】：我實(shí)驗(yàn)室前期的工作證明了在痘苗病毒天壇株(簡稱為wtVTT)的DelⅢ和HA基因編碼區(qū)位點(diǎn)插入外源基因GFP所構(gòu)建的重組天壇病毒(簡稱為TTpZCl和TTZCl),不但在體內(nèi)外源基因GFP可以得到很好的表達(dá),而且重組天壇病毒的毒力得到明顯下降。這為wtVTT作為有效的重組病毒疫苗載體提供可能。我們將SARS-CoV的全長Spike基因插入到wtVTT的DelⅢ位點(diǎn)(簡稱為VTT-S),希望其能成為有效的抗SARS疫苗。然而,無論天壇病毒作為何種重組病毒疫苗載體,我們都必須面對的一個問題是：1980年以前出生的中國人都注射過天壇病毒作為預(yù)防天花的疫苗。即在這個數(shù)量龐大的群體中,存在著不可忽視的預(yù)先免疫原性的影響。如果人體內(nèi)針對天壇病毒的預(yù)先免疫影響了以天壇病毒作為載體的其他種類疫苗發(fā)揮效力,那么這種重組天壇病毒還是無法成為有效的疫苗。因此我們設(shè)計(jì)了一套完整的實(shí)驗(yàn)：即在小鼠體內(nèi)通過注射wtVTT來構(gòu)建預(yù)先免疫的模型,而后再用疫苗VTT-S免疫小鼠,檢測VTT-S疫苗的效力是否受到影響。幾組對照分別是：naive的小鼠直接注射VTT-S;用同樣在DelⅢ位點(diǎn)插入Spike基因的重組痘苗MVA-S病毒(此重組病毒疫苗已經(jīng)被證明能夠?yàn)樾∈蠛秃镒幽Ｐ吞峁┝己玫目筍ARS侵染的保護(hù))(Chen et al.,2005),分別注射有預(yù)先免疫原性的小鼠和naive的小鼠,以和VTT-S的效力進(jìn)行比較；我們還用TTZC1病毒在小鼠體內(nèi)構(gòu)建預(yù)先免疫的模型,然后在同上面的方法注射VTT-S和MVA-S,目的是和wtVTT的預(yù)先免疫影響進(jìn)行比較。將幾組實(shí)驗(yàn)的小鼠血清檢測其針對SARS-S蛋白的抗體水平,得到的結(jié)論是：wtVTT的預(yù)先免疫原性對VTT-S疫苗的影響不太大,在wtVTT通過subc途徑預(yù)先免疫的情況下,VTT-S可以通過in.和oral途徑來較好的發(fā)揮效力。而subc途徑不是VTT-S發(fā)揮效力的良好途徑(無論有否預(yù)先免疫的影響)。而當(dāng)wtVTT通過in.或oral途徑預(yù)先免疫的時(shí)候,VTT-S再通過這兩個途徑免疫,則效果很差。VTT-S在多種免疫途徑的情況下都比MVA-S效果好,是更加強(qiáng)有力的疫苗。TTZC1病毒的預(yù)先免疫原性的影響比wtVTT略小,且使用更加安全,是更好的天花疫苗。
[Abstract]:Earlier work in our laboratory proved that the recombinant Temple of Heaven virus (TTpZCl and TTZCl),) was constructed by inserting foreign gene GFP into the Del 鈪，

本文編號：2368567