【摘要】：YycFG雙組分信號轉導系統(tǒng)調控葡萄球菌細胞壁合成、代謝及生物膜形成,PAS是組氨酸激酶YycG的胞外信號感應區(qū)域。本研究針對胞外PAS區(qū)域制備抗YycG-PAS單克隆抗體(YycG-PAS MAb)。免疫鑒定結果表明,YycG-PAS MAb可與重組YycG-PAS蛋白和表皮葡萄球菌菌體YycG蛋白結合,屬于IgG2a亞型,效價為log 215。YycG-PAS MAb(80μg/ml)與表皮葡萄球菌RP62A菌株共培養(yǎng)24h,對細菌生物膜形成的抑制率達46.5%,與mIgG(80μg/mL)組相比有顯著差異(P0.05)。YycG-PAS MAb(80μg/ml)與低濃度萬古霉素(1μg/ml)聯(lián)用可增強對24h細菌生物膜的抑制作用,抑制率由57.6%提高至93.0%(P0.01)。YycG-PAS MAb對浮游狀態(tài)表皮葡萄球菌的生長及存活無顯著影響。本研究為YycGPAS MAb在抗生物膜感染中的潛在應用價值奠定了一定基礎。
[Abstract]:YycFG two-component signal transduction system regulates staphylococcus cell wall synthesis metabolism and biofilm formation. PAS is an extracellular signal sensing region of histidine kinase YycG. In this study, monoclonal antibodies against YycG-PAS (YycG-PAS MAb).) were prepared for extracellular PAS region. The results of immunoassay showed that YycG-PAS MAb could bind to recombinant YycG-PAS protein and YycG protein of Staphylococcus epidermidis and belonged to IgG2a subtype. The titer of log 215.YycG-PAS MAb (80 渭 g/ml) cocultured with RP62A strain of Staphylococcus epidermidis was 24 h. The inhibition rate on bacterial biofilm formation was 46.5%. YycG-PAS MAb (80 渭 g/ml) combined with vancomycin at low concentration (1 渭 g/ml) could enhance the inhibitory effect of YycG-PAS MAb (80 渭 g/ml) on bacterial biofilm in 24 h compared with that in mIgG (80 渭 g/mL) group. The inhibitory rate was increased from 57.6% to 93.0% (P0.01). YycG-PAS MAb had no significant effect on the growth and survival of S.epidermidis. This study laid a foundation for the potential application value of YycGPAS MAb in biofilm infection.
【作者單位】： 復旦大學基礎醫(yī)學院病原生物學系教育部/衛(wèi)生部醫(yī)學分子病毒學重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金(81101214 81271791)
【分類號】：R392

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