【摘要】：目的建立一種可用于體外研究椎間盤退變的椎間盤器官培養(yǎng)模型,探討滲透性負(fù)荷對(duì)模型椎間盤細(xì)胞活力和代謝的影響。 方法4～6月齡新西蘭大白兔10只,均分為兩組,處死后立即手術(shù)切取胸腰段椎間盤,每只9個(gè),分別在等滲(300 mOsm/kg,等滲組)或高滲(410 mOsm/kg,高滲組)培養(yǎng)基中進(jìn)行整體器官培養(yǎng),在培養(yǎng)前和培養(yǎng)后的第7、14、21、28天,利用Mitotracker Green熒光探針、組織化學(xué)和生物化學(xué)方法評(píng)估兩組椎間盤髓核細(xì)胞的活力、結(jié)構(gòu)的完整性以及蛋白多糖含量的變化。 結(jié)果取材后培養(yǎng)前椎間盤髓核細(xì)胞的熒光強(qiáng)度最高,為11503±402,在體外培養(yǎng)過(guò)程中,高滲組第14天熒光強(qiáng)度為9202±907,與培養(yǎng)前比較差異有顯著性意義(P0.05),第7、21和28天分別為10504±710、10860±711、10713±953;等滲組第7、14、21、28天分別為11350±351、11207±385、10914±300、10862±229,與培養(yǎng)前相比較無(wú)顯著性差異(P0.05),兩組在第7、21和28天時(shí)無(wú)顯著性意義(P0.05)。在培養(yǎng)過(guò)程中,兩組椎間盤髓核和纖維環(huán)的組織結(jié)構(gòu)能夠基本保持完整。髓核蛋白多糖含量在培養(yǎng)的第7天高滲組和等滲組分別為3.33±.028和2.83±0.25,均較培養(yǎng)前(5.03±0.37)明顯降低(P0.01),第14、21、28天時(shí)與第7天相比下降不明顯(P0.05),兩組相同時(shí)間點(diǎn)的差異無(wú)顯著性意義(P0.05)。 結(jié)論椎間盤器官培養(yǎng)模型可以在等滲或高滲環(huán)境中有效維持兔椎間盤結(jié)構(gòu)的完整性和髓核細(xì)胞的活力至少4周。
[Abstract]:Objective to establish an organ culture model of intervertebral disc degeneration in vitro and to explore the effect of osmotic loading on the cell viability and metabolism of intervertebral disc. Methods Ten New Zealand white rabbits aged 4 to 6 months were divided into two groups. The thoracolumbar intervertebral discs were removed immediately after death, each of 9 rabbits were divided into isosmotic group (300 mOsm/kg, isosmotic group) or hyperosmotic group (410 mOsm/kg,). The whole organ was cultured in the medium of hyperosmotic group. The viability of nucleus pulposus cells in the two groups was evaluated by Mitotracker Green fluorescence probe, histochemical and biochemical methods before and after culture. Structural integrity and changes in proteoglycan content. Results the fluorescence intensity of nucleus pulposus cells was the highest (11503 鹵402) before culture. The fluorescence intensity in hyperosmotic group was 9202 鹵907 on the 14th day, which was significantly different from that before culture (P0.05). On the 21st and 28th days, it was 10504 鹵71010860 鹵711713 鹵953, respectively. In the isosmotic group, it was 11350 鹵351U 11207 鹵385U 10914 鹵300m 10862 鹵229on the 28th day, no significant difference was found between the two groups (P0.05), but there was no significant difference between the two groups on the 7th day and 28th day (P0.05). The tissue structure of the nucleus pulposus and the fibrous ring of the intervertebral disc were basically intact during the culture. The contents of myelin proteoglycan in hyperosmotic group and isosmotic group were 3.33 鹵0.28 and 2.83 鹵0.25 on the 7th day, respectively, which were significantly lower than those before culture (5.03 鹵0.37) (P0.01). There was no significant difference between the two groups in the same time point (P0.05) at the 28th day after the 14th day (P0.05) and the 7th day (P0.05). Conclusion the model of intervertebral disc organ culture can effectively maintain the integrity of intervertebral disc structure and the viability of nucleus pulposus cells in isosmotic or hyperosmotic environment for at least 4 weeks.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R681.5;R-332

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本文編號(hào)：2328426