【摘要】：調(diào)查研究神經(jīng)元在生存環(huán)境或基因改變后其對生存挑戰(zhàn)耐受性的研究是目前研究的重要領(lǐng)域。實際上,在多種神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病、阿爾茨海默氏病和亨廷頓病等,遺傳疾病肌萎縮側(cè)索硬化癥,氧化應(yīng)激腦缺血的誘導(dǎo)的中風(fēng)中,神經(jīng)元的存活和死亡被作為一個通常的病理特征來研究。神經(jīng)細胞大量非正常死亡將嚴重影響神經(jīng)元的功能,所以深入了解和研究神經(jīng)系統(tǒng)在這些病理狀況下的適應(yīng)和抵抗機制是當今研究的重點。近期文獻報道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路參與神經(jīng)細胞死亡。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細胞的主要細胞器之一,其主要功能是是確保分泌蛋白的正確折疊。在許多生理和病理狀態(tài)中,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可以發(fā)生功能上的改變,導(dǎo)致大量錯誤折疊的蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中聚集。這些大量積累的錯誤折疊蛋白將破壞自身穩(wěn)定和功能。所以細胞自身的主要應(yīng)激響應(yīng)就是通過減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)的組裝(例如削弱蛋白質(zhì)的翻譯)來恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自身的穩(wěn)定狀態(tài)以及增強對錯誤折疊蛋白的處理(例如增強內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)的降解途徑)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激響應(yīng)主要通過三條信號通路介導(dǎo),分別是PERK、IRE1以及ATF6。近期研究表明,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通路涉及到多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,包括神經(jīng)退行性疾病以及腦局部缺血。在慢性或急性應(yīng)激內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)下,決定神經(jīng)細胞命運的的機制仍然未研究清楚。最近的研究表明的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的強弱和相關(guān)信號通路激活的程度決定細胞最終的命運。 本文研究證明衣霉素可誘導(dǎo)小腦顆粒神經(jīng)元細胞凋亡,FGF2可顯著抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所誘導(dǎo)的小腦顆粒神經(jīng)元細胞凋亡。本文顯示NCK1蛋白和PI3K/AKT信號通路在FGF2抵抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所誘導(dǎo)的細胞凋亡中扮演重要的角色。在小腦顆粒神經(jīng)元細胞中FGF2可激活PI3K/AKT信號通路,其通過影響PERK-eIF2α通路改變CHOP蛋白的表達從而抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的小腦顆粒神經(jīng)元細胞凋亡。此外,我們證明NCK-1在FGF2抵抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所誘導(dǎo)的小腦顆粒神經(jīng)元細胞凋亡中扮演重要的角色。在小鼠C17.2細胞中過表達NCK-1蛋白時,不僅顯著抑制FGF2誘導(dǎo)的AKT激活和顯著增加細胞內(nèi)基本AKT磷酸化的程度,而且顯著抑制在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時FGF2增強的eIF2α磷酸化和顯著抑制在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時FGF2減弱的CHOP蛋白表達。過表達NCK1蛋白顯著抑制衣霉素誘導(dǎo)的eIF2α磷酸化以及顯著增強衣霉素誘導(dǎo)的CHOP蛋白表達。 為進一步證明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對神經(jīng)細胞生存的影響,我們設(shè)計實驗系來闡明在急性和慢性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下,小腦顆粒神經(jīng)元和c17.2小鼠神經(jīng)干細胞應(yīng)激機制。本文使用衣霉素(TM)和二硫蘇糖醇(DTT)兩個典型的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)者來模擬相應(yīng)的慢性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和急性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。我們的結(jié)果顯示JNK激活持續(xù)的時間是決定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下細胞存活的重要因素。在小腦顆粒神經(jīng)元和c17.2小鼠神經(jīng)干細胞衣霉素誘導(dǎo)JNK暫時性激活進而磷酸化BAD是細胞自身的保護活動,而DTT誘導(dǎo)JNK持續(xù)性激活誘導(dǎo)細胞促凋亡信號的激活。我們證明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的JNK通過調(diào)控MKP-1/DUSP1的表達進而調(diào)控JNK激活的狀態(tài)。衣霉素和二硫蘇糖醇誘導(dǎo)的MKP-1磷酸化和蛋白表達水平有所差異。在小腦顆粒神經(jīng)元和c17.2小鼠神經(jīng)干細胞產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時,衣霉素通過誘導(dǎo)MKP-1絲氨酸359位點的磷酸化來增加MKP-1蛋白的穩(wěn)定性的機制闡明了JNK暫時性激活以及導(dǎo)致細胞存活的原因。這些結(jié)果表明MKP-1通過正調(diào)控JNK- BAD信號通路來調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細胞凋亡。此外,我們證明在小腦顆粒神經(jīng)元細胞衣霉素誘導(dǎo)GSK3β絲氨酸位點9持續(xù)性磷酸化,而DTT顯著抑制GSK3β絲氨酸位點9持續(xù)性磷酸化。衣霉素通過JNK- GSK3β信號通路來調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細胞凋亡。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R363

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李載權(quán),周愛儒,唐朝樞;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)分子機理研究進展[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2004年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 牛志電;銅對大鼠海馬CAl區(qū)神經(jīng)元A-電流和延遲整流鉀電流的影響[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2006年

2 侯海龍;tau、突觸素及hHrd1在神經(jīng)發(fā)育和Alzheimer病中的變化與作用[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2007年

3 曾悅;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路在高甘油三酯血癥合并急性胰腺炎大鼠發(fā)病中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 毛紅麗;酸性肽對神經(jīng)細胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2和Bax表達的影響[D];鄭州大學(xué);2005年

2 鐘軍華;滋補脾陰方藥對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激神經(jīng)元損傷的保護作用及機制研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

3 梁曉華;Bnip3L與Bcl-2在非小細胞肺癌中的表達[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 梁海靜;熱休克蛋白70對青光眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞保護作用的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

5 任莉萍;GRP78在apoE基因缺失小鼠腦、肝臟及主動脈中的基因表達分析[D];山東師范大學(xué);2007年

6 賈克;地卓西平和牛磺酸對氯化錳致大鼠神經(jīng)毒性的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

7 焦亮;艾司洛爾對氣管插管應(yīng)激反應(yīng)中血流動力學(xué)、血漿內(nèi)皮素及血栓素A_2的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

8 蔡凱晉;慢性缺氧/再氧合對小鼠腦Nip3、細胞凋亡及β-淀粉樣蛋白沉積的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2007年

，

本文編號：2316824