【摘要】： [目的]表皮干細(xì)胞作為皮膚發(fā)生修復(fù)重建的關(guān)鍵源泉,其生物學(xué)作用尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過探討表皮干細(xì)胞對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的黏附、增殖等生物學(xué)行為的影響,進(jìn)一步揭示表皮干細(xì)胞在組織修復(fù)過程中可能的生物學(xué)作用。 [方法]以Ⅳ膠原作為底物,培養(yǎng)表皮細(xì)胞。利用Ⅳ膠原的快速黏附法分離培養(yǎng)表皮干細(xì)胞。然后利用免疫細(xì)胞化學(xué)分別對(duì)角蛋白19和β1整合素進(jìn)行鑒別。將制備的表皮細(xì)胞懸液接種在包被有Ⅳ膠原24孔板上(共6板)。隨機(jī)分為2組:A組為未棄掉表皮干細(xì)胞組,B組為棄掉表皮干細(xì)胞組。制備好表皮細(xì)胞懸液后,調(diào)整細(xì)胞密度為1×10~5/ml,接種于鋪有Ⅳ膠原的24孔板上。溫箱內(nèi)孵育15分鐘后吸掉其中B組的上清液,調(diào)整細(xì)胞密度為1×10~5/ml后接種在24孔板上繼續(xù)作角質(zhì)形成細(xì)胞的培養(yǎng)。分別取培養(yǎng)1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天細(xì)胞每天取4孔在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),取其平均值,繪制生長(zhǎng)曲線圖。 [結(jié)果]培養(yǎng)出來的表皮干細(xì)胞通過鑒定角蛋白19和β1整合素均有陽性表達(dá);顯微鏡下可見A組(未棄掉表皮干細(xì)胞組)細(xì)胞在第2天即可看到大部分細(xì)胞貼壁,第3天可見細(xì)胞成集落樣生長(zhǎng),且在第6天時(shí)大部分細(xì)胞連成片;而B組(棄掉表皮干細(xì)胞組)細(xì)胞貼壁相對(duì)緩慢,且形成的集落小而少。通過繪制生長(zhǎng)曲線可見A組(未棄掉表皮干細(xì)胞組)細(xì)胞較B組(棄掉表皮干細(xì)胞組)細(xì)胞生長(zhǎng)速度要快,并且在各時(shí)像點(diǎn)細(xì)胞數(shù)均高于對(duì)照組。 [結(jié)論]表皮干細(xì)胞對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖有正性調(diào)節(jié)作用,表皮干細(xì)胞可能通過分泌某種“表皮干細(xì)胞因子”對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞發(fā)揮作用。
[Abstract]:Objective: the biological function of epidermal stem cells as the key source of skin repair and reconstruction is unclear. In this study, the effects of epidermal stem cells on the adhesion and proliferation of keratinocytes were studied to reveal the possible biological role of epidermal stem cells in tissue repair. [methods] the epidermal cells were cultured with collagen 鈪，

本文編號(hào)：2306388