【摘要】：目的探討丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白對轉(zhuǎn)錄因子ETF和TxRE活性的調(diào)控作用。方法對于瞬時轉(zhuǎn)染p IRES-Core/Neo載體的L02細(xì)胞采用雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測核心蛋白對轉(zhuǎn)錄因子ETF和TxRE活性影響,并提取2株細(xì)胞的核蛋白和RNA,分別以Western blot試驗和實時熒光定量PCR檢測2種轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)量。結(jié)果雙熒光素酶報告基因檢測在L02-Core和L02-Neo細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子ETF和TxRE的活性比值分別為2.981和3.063。Western blot試驗灰度值分析2株細(xì)胞的核蛋白提取物中這2種蛋白表達(dá)量的比值分別為1.510和2.717。實時熒光定量PCR檢測這2株細(xì)胞中ETF和TxRE的核酸水平比值分別為4.123和3.703。結(jié)論在表達(dá)HCV核心蛋白的L02細(xì)胞中,轉(zhuǎn)錄因子ETF和TxRE轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平及轉(zhuǎn)錄活性均較高,HCV核心蛋白可能具有增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄因子ETF和TxRE轉(zhuǎn)錄活性的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hepatitis C virus (HCV) core protein on the activity of transcription factor ETF and TxRE. Methods double luciferase reporter gene system was used to detect the effect of core protein on transcription factor ETF and TxRE activity in L02 cells transfected with p IRES-Core/Neo vector, and to extract nuclear protein and RNA, from two cell lines. Western blot assay and real-time quantitative PCR were used to detect the expression of two transcription factors. Results the ratio of activity of double luciferase reporter gene to transcription factor ETF and TxRE in L02-Core and L02-Neo cells was 2.981 and 3.063.Western blot respectively. The expression ratio of seed protein was 1.510 and 2.717 respectively. The ratio of nucleic acid level of ETF and TxRE was 4.123 and 3.703, respectively. Conclusion the transcription level and activity of transcription factors ETF and TxRE are high in L02 cells expressing HCV core protein. HCV core protein may enhance the transcription activity of ETF and TxRE.
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;沈陽藥科大學(xué);
【基金】：國家“十二五”重大專項[(2012ZX10002003-004-009)2011-2015]
【分類號】：R373

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本文編號：2295922