【摘要】： 背景和目的: 長期大量飲酒可以引起股骨頭壞死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH),已經(jīng)證實(shí)酒精中毒是ONFH的一個(gè)確定病因。制作理想的動(dòng)物模型,可以為深入研究酒精性O(shè)NFH的發(fā)病機(jī)制和防治措施提供良好的載體。1998年王義生等首次報(bào)道采用灌胃法成功制成兔酒精性O(shè)NFH的動(dòng)物模型,此后多位學(xué)者進(jìn)行了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究,證明灌胃法模擬人類飲酒,制成的動(dòng)物模型組織學(xué)變化符合人類ONFH早期病理特征,是酒精性O(shè)NFH動(dòng)物模型較好的造模方法。但是兔、鼠等四肢動(dòng)物的負(fù)重特點(diǎn)與人類不同,且造模周期較長。為了解決這些問題,我們在馬血清致敏條件下,采用灌胃法成功制作出雞酒精性O(shè)NFH動(dòng)物模型,具有類似人類雙下肢負(fù)重、造模周期短、成功率高等特點(diǎn)。 材料和方法: 取64只健康成年雄性三黃雞(河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)隨機(jī)分為4組,每組16只。A組(馬血清+酒精組):給予馬血清(美國GIBICO公司)10ml/kg靜脈注射2次,間隔2周,從第2次給予馬血清2周后次日開始采用灌胃法給予烈性白酒(含乙醇46%)10ml/kg·d;B組(單純酒精組):與A組同步同法給予等量白酒;C組(單純馬血清組):與A組同步同法給予等量馬血清;D組(空白對照組):不給予馬血清或酒精。C、D組與A組同步同法給予生理鹽水(N·S)10ml/kg·d灌胃。于灌胃第4、8周末分批處死,取股骨頭制作常規(guī)和冰凍切片,分別行HE和蘇丹Ⅲ染色,光鏡觀察組織學(xué)變化并測算最大脂肪細(xì)胞平均直徑、骨小梁面積分?jǐn)?shù)、空骨陷窩計(jì)數(shù)、股骨頭壞死發(fā)生率等指標(biāo)。于灌胃第8周末,各組分別取2只動(dòng)物股骨頭制作標(biāo)本,掃描電鏡觀察組織學(xué)變化。 結(jié)果: 1.一般狀況:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無1例死亡。注射馬血清后,動(dòng)物一般狀況無明顯變化。灌灑4周,A、B組動(dòng)物食欲差,體重下降,毛發(fā)光澤差,精神狀態(tài)稍差,灌酒8周,A、B組動(dòng)物食欲差,體重明顯下降,毛發(fā)無光澤,精神狀態(tài)差,C、D組一般狀況好,與實(shí)驗(yàn)前無明顯變化。 2.肝臟:灌胃第4周術(shù),各組肝臟大體和光鏡下均無明顯變化。灌胃第8周末,A組肝臟增大,質(zhì)脆,呈淡黃色,切面有滑膩感,光鏡檢查,肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)脂肪空泡,以小葉中央?yún)^(qū)受累最為明顯,脂肪染色可見小葉中央?yún)^(qū)遍布桔紅色脂肪顆粒;B組動(dòng)物肝臟有類似改變,但變化程度較之A組輕微;C、D組動(dòng)物肝臟為暗紅色,質(zhì)軟,光鏡檢查無變化。 3.股骨頭:大體觀察:灌胃第4周末,各組動(dòng)物股骨頭大體形態(tài)、質(zhì)地?zé)o明顯變化。灌胃第8周末,各組動(dòng)物股骨頭大體形態(tài)無明顯變化,A組股骨頭較其它各組松脆,易于鑿切。光鏡檢查:灌胃第4周末:各組股骨頭組織未見明顯病理改變,僅A組中少部分動(dòng)物出現(xiàn)軟骨下骨髓內(nèi)造血組織減少。灌胃第8周末:病理改變明顯,主要集中在股骨頭軟骨下區(qū)。A組HE染色可見骨髓內(nèi)造血組織明顯減少,骨小梁明顯變細(xì)、稀疏,多處斷裂,結(jié)構(gòu)紊亂,空骨陷窩明顯增多,脂肪染色見軟骨下骨的骨細(xì)胞內(nèi)充滿桔紅色的脂質(zhì),脂肪細(xì)胞增殖肥大,脂肪堆積明顯。B組中有2只動(dòng)物見到股骨頭軟骨下骨髓內(nèi)造血組織減少,脂肪組織增多,其中1只可見少部分骨小梁骨小梁變細(xì)、稀疏、斷裂,空骨陷窩增多。C組中有2只動(dòng)物股骨頭內(nèi)可見骨髓內(nèi)造血組織減少,脂肪組織增多。D組未見到這些異常變化。A組骨小梁面積分?jǐn)?shù)(32.2±2.58)%減少、空骨陷窩計(jì)數(shù)(21.60±2.12)%增加、最大脂肪細(xì)胞平均直徑(47.22±2.79)μm增大,與其它3組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 4.骨壞死發(fā)生率:灌胃第4周末,各組骨壞死率均為0。灌胃第8周末,A組有7只發(fā)生骨壞死(7/8,其中雙側(cè)的5只,一側(cè)的2只,1級(jí)、2級(jí)比例為3/9),占87.5%;B組有2只發(fā)生骨壞死(2/8,均為單側(cè),1、2級(jí)各一),占25%;C組有2只發(fā)生骨壞死(2/8,均為單側(cè)1級(jí)),占25%;D組無發(fā)生骨壞死者。A組與其它3組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 5.掃描電鏡檢查:灌胃第8周末,A組股骨頭表面可見凹陷,伴有多處裂痕,剖面可見骨小梁失去原有形態(tài),變細(xì)、稀疏,多處斷裂,空骨陷窩增多,而B、C、D組未見到這些變化。 小結(jié): 1.馬血清致敏條件下,采用灌胃法成功制作出雞酒精性O(shè)NFH動(dòng)物模型,具有造模周期短、成功率高等特點(diǎn)。 2.雞可以作為酒精性O(shè)NFH的研究對象,具有類似人類雙下肢負(fù)重的特點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R-332;R681.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2291695