【摘要】：背景:DNA甲基胞嘧啶雙加氧酶TET家族可將甲基胞嘧啶氧化為羥甲基胞嘧啶,參與機(jī)體DNA去甲基化,調(diào)控細(xì)胞增殖與分化,但其在牙髓細(xì)胞中的表達(dá)模式仍不清楚。目的:檢測TET家族在牙髓細(xì)胞成牙本質(zhì)分化過程中的表達(dá)模式。方法:采用酶消化法分離培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞,細(xì)胞免疫熒光法檢測TET家族的表達(dá)及分布;Western Blot檢測TET家族在牙髓細(xì)胞傳代培養(yǎng)(P1-P7代)中的表達(dá)規(guī)律;對第3代牙髓細(xì)胞礦化誘導(dǎo)7,14 d,qR T-PCR法檢測礦化誘導(dǎo)第0,7,14 d的TET家族mR NA水平,Western Blot法檢測其蛋白量的表達(dá)變化。結(jié)果與結(jié)論:TET家族在人牙髓細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均有表達(dá)。在牙髓細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)過程中,TET1蛋白在P1-P6代隨細(xì)胞傳代呈上升趨勢,TET2蛋白在P2和P3代細(xì)胞中表達(dá)增強(qiáng)(P0.05),TET3表達(dá)量在不同細(xì)胞代數(shù)之間差異無顯著性意義(P0.05)。細(xì)胞經(jīng)礦化誘導(dǎo)后,TET1,TET2和TET3的mR NA和蛋白表達(dá)量均升高(P0.05)。以上結(jié)果提示TET家族可能參與調(diào)控牙髓細(xì)胞成牙本質(zhì)分化進(jìn)程。
[Abstract]:Background: TET family can oxidize methylcytosine to hydroxymethyl cytosine, participate in DNA demethylation, regulate cell proliferation and differentiation, but its expression pattern in dental pulp cells is still unclear. Aim: to investigate the expression pattern of TET family during odontoblast differentiation. Methods: human dental pulp cells were isolated and cultured by enzyme digestion. The expression of TET family and the expression of TET family in dental pulp cell subculture (P1-P7 passage) were detected by immunofluorescence assay. The level of mR NA in TET family was detected by QR T-PCR method at 714 d after mineralization induction in the third generation of dental pulp cells. The protein expression was detected by Western Blot method. Results and ConclusionThe cell cytoplasm and nucleus of human dental pulp cells were expressed in the family of: TET. In vitro passage of dental pulp cells, the expression of Tet T 1 protein in P1-P6 cells increased with cell passage. (P0.05) there was no significant difference between different cell generations in the expression of Tet T 1 protein in P2 and P3 generation cells (P0.05). The expression of mR NA and protein in Tet _ 1, T _ 2 and TET3 increased after mineralization (P0.05). These results suggest that TET family may be involved in the process of odontoblast differentiation.
【作者單位】： 中山大學(xué)光華口腔醫(yī)學(xué)院·附屬口腔醫(yī)院牙體牙髓病科;廣東省口腔醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81170953)~~
【分類號】：R329.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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3 莊Y，

本文編號：2225104