發(fā)布時間：2018-09-03 10:41

【摘要】：目的觀察神經(jīng)前體細胞表達下調(diào)因子8(NEDD8)類泛素修飾抑制因子MLN4924對單核巨噬細胞白血病細胞增殖的影響,并探討其作用機制。方法 MLN4924 0.25~4.0μmol·L-1與U937細胞、THP-1細胞、Mo7e細胞和RAW264.7細胞作用24 h,采用MTT法檢測細胞存活。MLN4924 0.25~8.0μmol·L-1與RAW264.7細胞作用24 h,用Western蛋白質(zhì)印跡法檢測NEDD8類泛素化修飾的主要底物cullin蛋白表達水平。MLN4924 0.5μmol·L-1作用于RAW264.7細胞24 h,用流式細胞儀檢測細胞周期和細胞凋亡率。結(jié)果 MLN4924 0.25~4.0μmol·L-1作用24 h對RAW264.7細胞、U937細胞、THP-1細胞和Mo7e細胞增殖具有抑制作用,IC50分別為0.52,3.11,2.89和0.76μmol·L-1;對正常小鼠骨髓巨噬細胞增殖無明顯影響。MLN4924 0.25~8.0μmol·L-1作用24 h,NEDD8類泛素化修飾的cullin蛋白表達減少(P0.01),表明RAW264.7細胞NEDD8修飾逐漸減少。MLN4924 0.5,1.0和2.0μmol·L-1作用于RAW264.7細胞24 h,G0/G1期細胞百分率由正常對照組的(61.3±1.3)%分別升高到(64.5±1.5)%(P0.05),(69.5±2.3)%(P0.01)和(72.8±1.7)%(P0.01),細胞凋亡率由正常對照組的(1.5±0.3)%分別升高到(2.3±0.5)%,(4.3±0.9)%(P0.05)和(7.5±0.8)%(P0.01)。結(jié)論 MLN4924能夠明顯抑制單核巨噬細胞白血病細胞增殖,并誘導其細胞周期阻滯和細胞凋亡。
[Abstract]:Objective To observe the effect of MLN4924 on the proliferation of monocyte-macrophage leukemia cells and explore its mechanism. Methods MLN4924 0.25-4.0 micromol.L-1 and U937 cells, THP-1 cells, Mo7e cells and RAW264.7 cells were treated for 24 hours. MTT assay was used to detect cell survival. The expression of Cullin protein in RAW264.7 cells treated with 924 0.25-8.0 micromol.L-1 for 24 hours was detected by Western blotting. The expression of Cullin protein in RAW264.7 cells treated with MLN4924 0.5 micromol.L-1 for 24 hours was detected by flow cytometry. Results The expression of Cullin protein in RAW264.7 cells treated with MLN4924 0.25-4.0 micromol.0 micromol.L-1 for 24 hours was detected by Western blotting. The proliferation of W264.7 cells, U937 cells, THP-1 cells and Mo7e cells was inhibited by IC50 of 0.52, 3.11, 2.89 and 0.76 micromol L-1, respectively. No significant effect on the proliferation of bone marrow macrophages was observed in normal mice. MLN 4924 0.5, 1.0 and 2.0 micromol L-1 treated RAW264.7 cells for 24 hours, the percentage of G0/G1 phase cells increased from (61.3 1.3)% to (64.5 1.5)% (P 0.05), (69.5 2.3)% (P 0.01) and (72.8 1.7)% (P 0.01) respectively, and the percentage of apoptosis increased from (1.5 0.3)% to (2.3 (4.3 0.9)% (P 0.05) in the normal control group. Conclusion MLN4924 can inhibit the proliferation of monocyte-macrophage leukemia cells and induce cell cycle arrest and apoptosis.
【作者單位】： 北京中醫(yī)藥大學中藥學院;軍事醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所免疫學研究室;
【基金】：國家科技重大專項(2013ZX09103003)~~
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;cAMP Modulates Macrophage Development by Suppressing M-CSF-Induced MAPKs Activation[J];Cellular & Molecular Immunology;2008年02期

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 胡高磊;劉英;伍會健;;NEDD化修飾系統(tǒng)及其在腫瘤發(fā)展中的作用[J];中國生物化學與分子生物學報;2014年09期

2 楊莉佳;王江;石秋燕;周田田;潘巍巍;;SCF E3泛素化連接酶的研究進展[J];四川生理科學雜志;2014年03期

3 晏琛;邵江華;;類泛素蛋白與肝癌[J];中國腫瘤臨床;2014年14期

4 沈瓊娜;胡小磊;陳鳳玲;;泛素折疊修飾因子1作用的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2014年19期

相關(guān)博士學位論文 前2條

1 廖善暉;結(jié)核分枝桿菌Pup蛋白的結(jié)構(gòu)特性研究以及布氏錐蟲SUMO、Nedd8系統(tǒng)的細胞功能研究[D];中國科學技術(shù)大學;2013年

2 程芳;Nedd化與皮膚黑素瘤發(fā)病機制的相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

相關(guān)碩士學位論文 前5條

1 蔣麗;CSF-1反義寡核苷酸對卵巢癌SKOV3細胞CSF-1基因表達及細胞增殖的影響[D];桂林醫(yī)學院;2013年

2 董揚;MLN4924對肺癌A549細胞凋亡的影響及其機制[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

3 朱婷;乳腺癌細胞中MKK7 neddylation的鑒定與生物學意義研究[D];中南大學;2013年

4 甘蕾;胃癌癌組織中CHIP的表達下調(diào)及其臨床意義[D];華中科技大學;2013年

5 沈瓊娜;氧化低密度脂蛋白對巨噬細胞類泛素折疊修飾蛋白表達的影響[D];蚌埠醫(yī)學院;2014年

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;cAMP elevators inhibit LPS-induced IL-12 p40 expression by interfering with phosphorylation of p38 MAPK in Murine Peritoneal Macrophages[J];Cell Research;2002年Z2期

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳玉惠;周偉光;高晶;高龍;冀顯亮;希尼尼根;;牛外周血單核巨噬細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];畜牧與飼料科學;2013年05期

2 戴繼紅,許峰,魯煥章;內(nèi)毒素刺激單核巨噬細胞活化的分子生物學[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);1998年01期

3 劉祝公,房蕾,陳慰峰;小鼠胸腺基質(zhì)細胞系分泌的趨化因子的分析[J];實驗生物學報;1996年01期

4 孔衛(wèi)娜;張彩云;段相林;常彥忠;;單核巨噬細胞鐵代謝相關(guān)蛋白的表達調(diào)控[J];生物物理學報;2010年04期

5 杜肖娜,王潤田;IL-15研究的最新進展[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);1999年05期

6 高晶;周偉光;肖詩琪;陳玉惠;高龍;冀顯亮;希尼尼根;;IBRV感染對牛單核巨噬細胞產(chǎn)生一氧化氮(NO)的影響[J];畜牧與飼料科學;2013年06期

7 王元書;G-CSF對小鼠和犬造血損傷的作用[J];上海實驗動物科學;2000年01期

8 傅春燕;蔣虹;薛婧;叢U，

本文編號：2219746