【摘要】：目的獲得一種高效、快速、簡便的提取球形孢子絲菌DNA的方法。方法以不同地區(qū)來源的球形孢子絲菌為實驗材料,采用CTAB法、異硫氰酸胍法、試劑盒法、堿裂解法4種方法分別提取球形孢子絲菌DNA。通過紫外吸光度法測定DNA的濃度和純度,瓊脂糖凝膠電泳、PCR擴增評價DNA的質(zhì)量。結(jié)果雖然不同方法均可得到球形孢子絲菌的DNA,但堿裂解法獲得DNA的濃度和純度明顯優(yōu)于其他3種方法。利用鈣調(diào)蛋白基因的引物對DNA進行PCR擴增后,各樣本均出現(xiàn)陽性條帶,且條帶亮度較好。結(jié)論堿裂解法是獲得高質(zhì)量球形孢子絲菌DNA的理想方法。
[Abstract]:Objective to obtain an efficient, rapid and simple method for the extraction of DNA from Sporocystis globosa. Methods DNAs from different regions were extracted by CTAB method, guanidine isothiocyanate method, Kit method and alkali lysis method respectively. The concentration and purity of DNA were determined by ultraviolet spectrophotometry and the quality of DNA was evaluated by agarose gel electrophoresis. Results although the DNA of S.globosa could be obtained by different methods, the concentration and purity of DNA obtained by alkaline lysis were obviously superior to those of the other three methods. After PCR amplification of DNA with calmodulin gene primer, positive bands were found in all samples, and the brightness of the bands was good. Conclusion Alkali lysis method is an ideal method for obtaining high quality DNA of Sporothrix globosa.
【作者單位】： 吉林大學(xué)第一醫(yī)院皮膚性病科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171509) 吉林省科技廳科技創(chuàng)新人才培育計劃(20150520039JH)
【分類號】：R379.9

【參考文獻】

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本文編號：2188593