發(fā)布時間：2018-08-14 09:23

【摘要】：證實端腦背側(cè)腦室區(qū)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞是否表達(dá)ChAT(乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶)以了解其是否產(chǎn)生膽堿能神經(jīng)元。 本實驗采用免疫組織化學(xué)技術(shù)和電鏡技術(shù)觀察了大鼠端腦背側(cè)產(chǎn)生的皮質(zhì)錐體神經(jīng)元的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞分裂以及ChAT(乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶)的表達(dá)。實驗首先采用Vimentin(波形蛋白)對端腦培養(yǎng)細(xì)胞進行免疫組化染色。其結(jié)果表明為陽性表達(dá)。通過E14大鼠胚胎端腦細(xì)胞進行體外原代培養(yǎng)觀察、培養(yǎng)細(xì)胞進行波形蛋白和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶雙重?zé)晒饷庖呒?xì)胞化學(xué)染色以在體外實驗中確定放射狀膠質(zhì)細(xì)胞是否表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶;并通過重疊同一視野內(nèi)的熒光單染的圖片來精確的體現(xiàn)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的位置。 結(jié)果顯示E14大鼠胚胎端腦細(xì)胞經(jīng)血清培養(yǎng)聚集成團的細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有呈Vimentin/ChAT免疫化學(xué)雙染陽性表達(dá)。細(xì)胞聚集成團,細(xì)胞團內(nèi)部雙染陽性細(xì)胞較多,細(xì)胞團間可見伸出的彼此聯(lián)系的突起,細(xì)胞沿突起在細(xì)胞團之間遷移,突起中也有Vimentin/ChAT免疫化學(xué)雙染陽性表達(dá)。此結(jié)果在體外實驗方面證實了E14大鼠端腦內(nèi)的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶。表明放射狀膠質(zhì)細(xì)胞具有神經(jīng)干細(xì)胞性質(zhì),它不斷地進行不對稱分裂,產(chǎn)生膽堿能表型的成神經(jīng)細(xì)胞,即膽堿能前體細(xì)胞。放射狀膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)元發(fā)生期進行不對稱分裂的同時已經(jīng)決定了它所產(chǎn)生神經(jīng)細(xì)胞的表型,合成神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿。結(jié)果提示:(1)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可以產(chǎn)生膽堿能神經(jīng)元;(2)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可能依據(jù)其產(chǎn)生不同神經(jīng)元的類型分為不同亞群;(3)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可能在大腦皮層的發(fā)育過程中起重要作用。 大鼠端腦放射狀膠質(zhì)細(xì)胞可產(chǎn)生皮質(zhì)膽堿能神經(jīng)元
[Abstract]:To confirm the expression of ChAT (acetylcholine transferase) in radiative glial cells of the dorsal ventricular region of the endencephalon to understand whether it produces cholinergic neurons. The morphology, cell division and expression of ChAT (acetylcholine transferase) of cortical pyramidal neurons produced at the dorsal end of the rat brain were observed by immunohistochemistry and electron microscopy. Firstly, Vimentin (vimentin) was used for immunohistochemical staining of cultured cells. The results showed positive expression. The primary culture of E14 rat embryonic brain cells was carried out in vitro. The cultured cells were stained with vimentin and acetylcholine transferase double fluorescent immunocytochemistry to determine whether the radial glial cells expressed acetylcholine transferase in vitro. The position of acetylcholinyltransferase (acetylcholinyltransferase) expressed by radial glial cells was precisely reflected by overlapping fluorescence monochromatic images in the same field. The results showed that Vimentin/ChAT immunocytochemical double staining was present in the cytoplasm of E14 rat embryonic brain cells. There were many double staining positive cells in the cell clusters, and the interlinked processes could be seen between the cell clusters. The cells migrated along the processes between the cell clusters, and there was Vimentin/ChAT immunocytochemical double staining positive expression in the processes. The results confirmed the expression of acetylcholine transferase in radiative glial cells of E14 rats in vitro. The results indicate that the radial glial cells have the nature of neural stem cells, and they divide unsymmetrically and produce cholinergic phenotypic neural cells, that is, cholinergic progenitor cells. The asymmetric division of radial glial cells during neuronogenesis has determined the phenotype of neurons and synthesized neurotransmitter acetylcholine. The results suggest that: (1) radiative glial cells can produce cholinergic neurons; (2) radial glial cells may be classified into different subgroups according to the types of neurons produced; (3) radial glial cells may have developed in the cerebral cortex. Cheng Zhong plays an important role. Cortical cholinergic neurons produced by radiative glial cells in rat telencephalon
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R329

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本文編號：2182414