【摘要】：目的探討SD大鼠食物過(guò)敏動(dòng)物模型建立的適宜條件及該模型消化系統(tǒng)超微結(jié)構(gòu)的改變。方法 30只SD大鼠隨機(jī)分為食物過(guò)敏組(20只),生理鹽水組(10只)。食物過(guò)敏組第1天及第15天以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)低劑量腹腔注射進(jìn)行基礎(chǔ)致敏及強(qiáng)化致敏;第20天起以O(shè)VA進(jìn)行高劑量隔日灌胃激發(fā)至第49天;對(duì)照組分別以等量生理鹽水進(jìn)行腹腔注射及灌胃。分別于1、2、3、4、5、6和7周采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清OVA-Ig E抗體水平,同時(shí)觀察大鼠腹瀉情況。第6周后處死動(dòng)物,取其十二指腸Treitz韌帶以下5 cm,經(jīng)固定、包埋、切片,甲苯胺蘭染色行肥大細(xì)胞完整性評(píng)估,HE染色下觀察腸道病理變化,電鏡觀察腸黏膜超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果食物過(guò)敏組OVA-Ig E水平在第4~6周逐漸升高,第7周下降,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。第6周食物過(guò)敏組大鼠均出現(xiàn)腹瀉。食物過(guò)敏組與對(duì)照組腸黏膜嗜酸粒細(xì)胞密度[(16.48±2.32)個(gè)湓HPF vs.(1.70±0.42)個(gè)湓HPF]、肥大細(xì)胞數(shù)總數(shù)[(9.02±1.55)個(gè)湓HPF vs.(1.84±0.87)個(gè)湓HPF]和完整性百分率[(36.50%±12.54%)vs.(92.20%±6.87%)]比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.01)。電鏡和光鏡下觀察,食物過(guò)敏組動(dòng)物小腸絨毛稀疏、脫落,細(xì)胞連接模糊,線粒體廣泛腫脹,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒。結(jié)論采用SD大鼠通過(guò)低劑量腹腔注射與高劑量灌胃激發(fā)至6周可成功建立理想食物過(guò)敏動(dòng)物模型,卵清蛋白致敏大鼠小腸腸黏膜損傷明顯,細(xì)胞連接模糊,可能在食物過(guò)敏發(fā)病機(jī)制中起重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the suitable conditions for establishing the animal model of food allergy in SD rats and the changes of the ultrastructure of digestive system in the model. Methods Thirty SD rats were randomly divided into food allergy group (n = 20) and saline group (n = 10). In the food allergy group, ovalbumin OVA (ovalbumin OVA) was injected intraperitoneally at low dose on the 1st and 15th day for basal sensitization and enhanced sensitization, and high dose OVA was administered to the stomach every other day until the 49th day from the 20th day. The control group received intraperitoneal injection and intragastric administration of the same amount of normal saline. The level of serum OVA-Ig E antibody was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) at 1, 2, 3, 4, 5, 5, and 7 weeks, respectively, and the diarrhea in rats was observed at the same time. After 6 weeks, the animals were killed, and the duodenal Treitz ligaments were taken under 5 cm, fixed, embedded, sectioned and stained with toluidine blue to evaluate the integrity of mast cells. The intestinal pathological changes were evaluated by HE staining, and the ultrastructure of intestinal mucosa was observed by electron microscope. Results the level of OVA-Ig E in the food allergy group increased gradually at the 4th week and decreased at the 7th week, which was significantly different from that in the control group (P0.01). Diarrhea was found in all the rats in the food allergy group at the 6th week. There were significant differences in eosinophil density (16.48 鹵2.32) HPF vs. (1.70 鹵0.42 HPF), mast cell count (9.02 鹵1.55) HPF vs. (1.84 鹵0.87) and integrity percentage (36.50% 鹵12.54%) vs. (92.20% 鹵6.87%) between food allergy group and control group (all P0.01). Under electron microscope and light microscope, the intestinal villi of food allergy group were sparse, shedding, cell connection blurred, mitochondria swelling, endoplasmic reticulum dilatation, endoplasmic reticulum degranulation. Conclusion the ideal animal model of food hypersensitivity can be established successfully by low dose intraperitoneal injection and high dose gastric perfusion for 6 weeks in SD rats. Ovalbumin sensitized rats have obvious intestinal mucosal damage and blurred cell connections. It may play an important role in the pathogenesis of food allergy.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬育英兒童醫(yī)院消化內(nèi)科;溫州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院超聲科;
【基金】：衛(wèi)生部國(guó)家臨床重點(diǎn)�？崎_放課題(20130109) 溫州市科學(xué)技術(shù)局科技計(jì)劃項(xiàng)目(Y20140062)
【分類號(hào)】：R725.9;R-332

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2161548