乳鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2018-07-24 15:40
【摘要】:目的優(yōu)化SD乳鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)的條件和方法。方法分別用胰酶、Ⅱ型膠原酶依次消化分離心肌組織,再通過(guò)兩次差速貼壁分離法分別收集、培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞。光學(xué)顯微鏡下分別觀察心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞的基本形態(tài)特征的變化,原代心肌細(xì)胞行心肌肌鈣蛋白免疫熒光鑒定,而心肌成纖維細(xì)胞則用第2代行波形蛋白免疫熒光鑒定。結(jié)果心肌細(xì)胞在2~4 h開(kāi)始貼壁生長(zhǎng),12~24 h貼壁速率大幅增加,并出現(xiàn)自發(fā)性搏動(dòng),48~72 h心肌細(xì)胞粘合成簇,細(xì)胞成活率,純度均達(dá)95%以上;心肌成纖維細(xì)胞第2~4代細(xì)胞生長(zhǎng)良好,純度高達(dá)98%以上。結(jié)論此種方法可得到產(chǎn)量大,純度高,活力好的心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞,為心血管疾病的基礎(chǔ)與臨床研究提供了理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?br/>[Abstract]:Objective to optimize the conditions and methods of isolation and culture of neonatal SD rat cardiomyocytes and cardiac fibroblasts in vitro. Methods Myocardial tissues were digested and separated by trypsin and collagenase 鈪,
本文編號(hào):2141851
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