【摘要】：目的:探討從小鼠骨髓中分離、培養(yǎng)、誘導分化及鑒定兩種內(nèi)皮祖細胞的方法,為進一步研究和臨床應用奠定基礎。方法:密度梯度離心法分離小鼠骨髓單個核細胞,接種于內(nèi)皮祖細胞條件培養(yǎng)基,通過貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)出早期內(nèi)皮祖細胞和晚期內(nèi)皮祖細胞,并在0 d、6 d、10 d流式鑒定早期內(nèi)皮祖細胞,在第8周流式鑒定晚期內(nèi)皮祖細胞。結(jié)果:通過體外貼壁擴增培養(yǎng),從小鼠骨髓細胞中成功培養(yǎng)出EEPC(早期內(nèi)皮祖細胞)和EOC(晚期內(nèi)皮祖細胞),表達CD34+/CD133+/VEGFR2+的EEPC比例從最初的0.08%能夠增長至70%;EOC大約出現(xiàn)于3-4周,5-8周時呈現(xiàn)指數(shù)增長,具有典型的內(nèi)皮細胞鵝卵石樣形態(tài),表達CD31、VEGFR2等內(nèi)皮細胞表面標志而不表達CD34、CD133等干細胞表面標志。結(jié)論:確立了內(nèi)皮祖細胞體外分離培養(yǎng)和誘導分化的實驗方法,為進一步研究奠定基礎。
[Abstract]:Objective: to investigate the methods of isolation, culture, differentiation and identification of two kinds of endothelial progenitor cells from mouse bone marrow, so as to lay a foundation for further study and clinical application. Methods: murine bone marrow mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation and inoculated in the conditioned medium of endothelial progenitor cells. The early and late endothelial progenitor cells were cultured by adherent culture. Endothelial progenitor cells (EPCs) were identified by flow cytometry at 0 d, 6 d, 10 d, and 8 weeks, respectively. Results: through in vitro adherent amplification culture, EEPC (early endothelial progenitor cells) and EOC (late endothelial progenitor cells) were successfully cultured from mouse bone marrow cells. The proportion of EEPC expressing CD34 / CD133 / VEGFR2 increased from 0.08% to 70%. It expressed CD31VEGFR2 and other endothelial cell surface markers, but not CD34, CD133 and other stem cell surface markers. Conclusion: the method of isolation, culture and differentiation of endothelial progenitor cells in vitro was established, which laid a foundation for further study.
【作者單位】： 第二炮兵工程大學門診部;第四軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院唐都醫(yī)院血液內(nèi)科;
【分類號】：R329.2;Q813

【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2140524