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低氧對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及血紅素加氧酶-1表達(dá)的的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-21 14:04
【摘要】: 目的:探討低氧對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)增殖及血紅素加氧酶-1(HO-1)表達(dá)的影響。 方法:密度梯度離心法分離、培養(yǎng)健康供者的單個(gè)核細(xì)胞;用流式細(xì)胞儀檢測(cè)hBMSCs中CD13、CD34、CD44、CD45、CD71、HLA-DR的表達(dá);用CoCl2建立化學(xué)低氧模型,MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在低氧條件下的增殖;通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR及流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)低氧下血紅素氧合酶-1mRNA及蛋白表達(dá)的量-效和時(shí)-效關(guān)系。 結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MSCs細(xì)胞表面抗原結(jié)果顯示高表達(dá)CD13、CD44、CD71,而CD34、CD45、HLA-DR表達(dá)陰性。CoCl2模擬的化學(xué)性低氧促進(jìn)了間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖,并且這種促增殖作用具有一定的時(shí)間及濃度依賴性。實(shí)時(shí)定量結(jié)果與流式細(xì)胞儀測(cè)得的結(jié)果相似:低氧促進(jìn)了人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中HO-1的表達(dá),并且這種表達(dá)呈現(xiàn)出較好的劑量和時(shí)間依賴性。 結(jié)論:CoCl2誘導(dǎo)慢性低氧促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖并可誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中血紅素加氧酶-1的表達(dá),并且低氧促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖與血紅素加氧酶-1表達(dá)間有一定的劑量和時(shí)間依賴性。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of hypoxia on the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells ( hMSCs ) and the expression of heme oxygenase - 1 ( HO - 1 ) .



Methods : Density gradient centrifugation was used to separate mononuclear cells from healthy donors .
The expression of CD13 , CD34 , CD44 , cd45 , CD71 and HLA - DR in hMSCs was detected by flow cytometry .
Using CoCl2 to establish a chemical hypoxia model , MTT assay and flow cytometry were used to detect the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells under hypoxia .
Quantitative - effect and time - effect relationship of heme oxygenase - 1 mRNA and protein expression in hypoxia were detected by real - time fluorescence quantitative PCR and flow cytometry .



Results : The results of flow cytometry showed that CD13 , CD44 and CD71 were highly expressed in the surface antigen of MSCs . The results showed that hypoxia promoted the expression of HO - 1 in human bone marrow mesenchymal stem cells and showed a good dose and time dependence .



Conclusion : CoCl2 induces chronic hypoxia to promote the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells and induce the expression of heme oxygenase - 1 in human bone marrow mesenchymal stem cells , and hypoxia promotes the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells and the expression of heme oxygenase - 1 .
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R329

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2135766

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