【摘要】： 干擾素(Interferon, IFN)是人和動物的干擾素產(chǎn)生細(xì)胞如B細(xì)胞、單核細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞,成纖維細(xì)胞等在病毒、細(xì)菌、合成的核苷酸以及其它一些小分子等的刺激下產(chǎn)生的微量的高生物學(xué)活性的糖蛋白。其中α4b干擾素(IFN-α4b)是干擾素產(chǎn)生的途徑中最早產(chǎn)生并且經(jīng)過Ⅰ型干擾素的正反饋途徑,產(chǎn)生量最多的α干擾素亞型。 CpG ODN是以非甲基化的胞嘧啶和鳥嘌呤核苷酸(CpG)為核心的寡聚脫氧核苷酸,對免疫系統(tǒng)有刺激性效應(yīng),是干擾素的誘生劑之一;而抑制性O(shè)DN(免疫抑制性寡核苷酸)可以抑制干擾素的產(chǎn)生或降低干擾素的產(chǎn)量。干擾素誘生劑通過TLR途徑或核酸結(jié)合蛋白途徑活化干擾素啟動子的轉(zhuǎn)錄因子IRF-7等,活化的轉(zhuǎn)錄因子和干擾素啟動子結(jié)合啟動干擾素的轉(zhuǎn)錄。 本研究的主要目的是基于干擾素產(chǎn)生的通路,構(gòu)建一個篩選ODN的實驗平臺。首先通過分子克隆實驗構(gòu)建了序列正確的小鼠α4b干擾素的真核報告基因pcDNA3/PmIFN-α4b-GFP;之后利用重組真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GFP,通過優(yōu)化的脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染L929細(xì)胞,建立了高效的外源重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)染平臺,為以后建立篩選ODN實驗平臺奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:A small amount of highly bioactive glycoprotein produced by the stimulation of synthetic nucleotides and other small molecules. Inhibitory ODN (immunosuppressive oligonucleotide) can inhibit the production of interferon or reduce the production of interferon. The aim of this study was to construct a platform for screening ODN based on interferon-producing pathway. A high efficient transfection platform of exogenous recombinant expression plasmid for transfection of mouse fibroblasts was established, which laid a foundation for the establishment of the experimental platform for screening ODN in the future.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2126068